Anticorpo Policlonale Anti-Collagene I/COL1A2 per WB, IF/ICC, ELISA - P08123

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Catena Collagene alfa-2(I)

• La catena collagene alfa-2(I) è una subunità del collagene di tipo I, il collagene fibrillare più abbondante nel corpo umano, che conferisce resistenza alla trazione ai tessuti connettivi.
• Insieme a due catene alfa-1(I), forma la molecola di procollagene di tipo I eterotrimerico, che subisce un processo proteolitico per assemblarsi in fibrille di collagene mature.
• Il collagene di tipo I è un componente strutturale principale della matrice extracellulare nella pelle, nell'osso, nei tendini, nei legamenti e in altri tessuti connettivi, dove si organizza in fibrille che nelle ossa sono mineralizzate con idrossiapatite di calcio.
• La proteina è sintetizzata come preproproteina con un peptide segnale, e la catena matura viene secreta nello spazio extracellulare, contribuendo all'assemblaggio supramolecolare delle fibre di collagene.
• Espressione tessuto-specifica: altamente espressa in tendini, legamenti e ossa, con l'organizzazione delle fibrille cruciale per le proprietà biomeccaniche; mutazioni in COL1A2 causano osteogenesi imperfetta e sindrome di Ehlers-Danlos.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'idrossilazione dei residui di prolina e lisina, la glicosilazione e la formazione di legami disolfuro, essenziali per la stabilità della tripla elica e il reticolamento delle fibrille.
• La proteina contiene un ampio dominio a tripla elica con caratteristiche ripetizioni Gly-X-Y, dove X è spesso prolina e Y è spesso idrossiprolina, e svolge un ruolo nell'adesione cellulare tramite siti di legame per le integrine.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico della regione C-terminale (aa 1161-1260) di COL1A2 umano, che può riconoscere sia la forma pro- che il collagene maturo; convalidare nel vostro sistema campione.
• Per il Western blot, utilizzare condizioni SDS-PAGE riducenti per dissociare i trimeri di collagene; notare che il peso molecolare teorico della catena pro-alfa-2 è di ~129 kDa, ma le forme mature processate possono apparire più piccole.
• Quando si esegue immunofluorescenza (IF/ICC), considerare che il collagene è secreto; se si colora il procollagene intracellulare, includere passaggi di permeabilizzazione e co-localizzare con marcatori del reticolo endoplasmatico/dell'apparato di Golgi.
• Le applicazioni ELISA possono essere utilizzate per rilevare frammenti di collagene solubili o collagene secreto nei surnatanti di coltura cellulare; ottimizzare le condizioni di rivestimento e rilevamento per la vostra matrice.
• L'anticorpo reagisce in modo crociato con topo e ratto, supportando studi traslazionali in modelli animali di fibrosi, malattie ossee e guarigione delle ferite.

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