Anticorpo policlonale anti-Collagen III alpha 1/COL3A1 per WB, IF/ICC, ELISA - P02461

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Collagen III alpha 1/COL3A1

• La catena alfa-1(III) del collagene è un collagene fibrillare principale che, insieme al collagene di tipo I, costituisce l'impalcatura strutturale della maggior parte dei tessuti connettivi molli, inclusi pelle, polmone e pareti vascolari.
• Gioca un ruolo critico nello sviluppo corticale fungendo da ligando primario per il recettore accoppiato a proteina G di adesione G1 (ADGRG1) nel cervello in via di sviluppo; questa interazione inibisce la migrazione neuronale e attiva la via di segnalazione RhoA attraverso l'accoppiamento con GNA13 e possibilmente GNA12.
• La proteina viene secreta nello spazio extracellulare e si assembla in fibrille sramolecolari all'interno della matrice extracellulare, dove fornisce resistenza alla trazione e integrità tissutale.
• COL3A1 subisce estese modificazioni post-traduzionali, tra cui idrossilazione della prolina, idrossilazione e glicosilazione della lisina, e formazione di ponti disolfuro, che sono essenziali per la corretta stabilità dell'elica triplo e per la secrezione.
• Le mutazioni in COL3A1 sono associate alla sindrome di Ehlers-Danlos, tipo vascolare (EDS4A/EDSVASC) e all'aneuraneurisma toracico familiare, sottolineando la sua importanza nel mantenimento della parete vascolare.
• Lo splicing alternativo genera varianti di trascrizione aggiuntive, sebbene il significato funzionale non sia completamente caratterizzato; l'isoforma principale ha un peso molecolare calcolato di circa 138,5 kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• La sequenza immunogenica (amminoacidi 1201-1301) si trova all'interno della regione del propeptide C-terminale del COL3A1 umano; considerare l'allineamento delle sequenze per valutare la reattività con altri tipi di collagene o ortologhi di specie.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di ~139 kDa; utilizzare un gel SDS-PAGE al 6–8% e tempi di trasferimento prolungati per garantire un trasferimento efficiente di questa proteina ad alto peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza e nell'immunocitochimica, le fibrille di collagene extracellulare potrebbero richiedere passaggi di permeabilizzazione e blocco ottimizzati per campioni ricchi di matrice; validare nel modello cellulare o tissutale specifico.
• Per l'ELISA, la natura policlonale può fornire un'ampia copertura dell'epitopo, ma si consiglia la titolazione e i controlli di reattività crociata contro altri membri della famiglia dei collagene (es. COL1A1) per confermare la specificità.

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