Anticorpo monoclonale di coniglio contro il fattore B del complemento (CFB) per WB, IF/ICC, ELISA - P00751

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del fattore B del complemento (CFB)

• CFB è un componente fondamentale della via alternativa del complemento e rappresenta il precursore della serina proteasi che forma le C3 e C5 convertasi. Riferimenti correlati: PMID:3638964, PMID:624565, PMID:6554279
• Dopo la scissione da parte del fattore D (CFD), CFB genera il frammento catalitico Bb, che forma un complesso con C3b per creare la C3 convertasi C3bBb; successivamente, legando un'altra C3b, forma la C5 convertasi. Riferimenti correlati: PMID:30643019, PMID:624565, PMID:6554279
• Il frammento Bb attivato scinde C3 e C5, producendo le anafilatossine C3a e C5a e l'opsonina C3b; questo processo amplifica l'attivazione del complemento e lo collega all'immunità innata e adattativa.
• CFB è anche coinvolto nella proliferazione e differenziazione dei linfociti B, nella diffusione dei monociti e nella blastogenesi linfocitaria, il che evidenzia i suoi ruoli immunomodulatori al di là della cascata del complemento.
• La proteina contiene domini sushi (CCP) e un dominio serina proteasico; è una glicoproteina con legami disolfuro, secreta e può essere rilevata sulla superficie cellulare.
• Dal punto di vista clinico, le mutazioni nel gene CFB sono associate alla degenerazione maculare senile (ARMD14) e alla sindrome emolitica uremica atipica (AHUS4), a dimostrazione della sua importanza per l'omeostasi immunitaria oculare e renale.

Linee guida sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 400-500 (NP_001701.2), che si trovano all'interno del frammento Bb (dominio catalitico). Questo anticorpo può rilevare sia il proenzima a lunghezza intera sia il frammento Bb attivato, quindi è adatto per monitorare l'attivazione di CFB.
• Per Western blot (WB), è previsto una banda di circa 86 kDa per CFB a lunghezza intera in campioni umani e di topo; validare in siero o modelli cellulari stimolati per il complemento.
• Per immunofluorescenza/ICC, valutare metodi di fissazione che preservino le proteine secrete e di superficie cellulare; la co-localizzazione con componenti del complemento può richiedere un'attenta ottimizzazione.
• Nelle applicazioni ELISA, utilizzare controlli positivi appropriati (ad esempio CFB ricombinante o siero con complemento attivato) e includere controlli negativi adeguati per garantire la specificità.

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