Anticorpo policlonale coniglio anti-Fattore D del complemento per WB, ELISA - P00746

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del fattore D del complemento

• Il fattore D del complemento (CFD), designato anche Adipsina, attivatore della convertasi C3 o fattore D properdina, è una proteasi a serina che funge da enzima iniziale della via alternativa del complemento, un componente critico dell'immunità innata. Riferimenti correlati: PMID:21205667, PMID:22362762, PMID:6769474
• Esso funziona clivando il fattore B del complemento (CFB) quando CFB è legato a C3b, formando così la convertasi C3 attiva (C3bBb) della via alternativa. Riferimenti correlati: PMID:21205667, PMID:6769474, PMID:874324
• La via alternativa viene innescata dall'idrolisi spontanea del complemento C3, e l'attivazione mediata da CFD genera le convertasi C3 e C5, che amplificano la cascata del complemento e promuovono l'opsonizzazione, l'infiammazione e la lisi dei patogeni. Riferimenti correlati: PMID:21205667, PMID:22362762, PMID:6769474
• Il CFD è una proteina secreta, rilasciata nel flusso sanguigno e nei fluidi extracellulari dove svolge la sua funzione proteolitica.
• Viene sintetizzato come una preproproteina con un peptide segnale e un peptide di attivazione; l'enzima maturo attivo viene generato dalla rimozione proteolitica del peptide di attivazione. Strutturalmente, possiede legami disolfuro canonici caratteristici delle proteasi a serina di tipo tripsina.
• Le mutazioni nel gene CFD sono collegate a carenze del complemento e a una maggiore suscettibilità alle infezioni, sottolineando il suo ruolo essenziale nella difesa immunitaria.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno consiste in una proteina di fusione ricombinante che comprende gli amminoacidi 26–253 del CFD umano, che corrisponde all'enzima maturo attivo. Pertanto, ci si aspetta che l'anticorpo riconosca sia la pro-forma che la proteasi attiva.
• Nell'analisi Western blot (WB), è prevista una banda specifica a circa 27 kDa in condizioni riducenti. Condizioni non riducenti possono rivelare multimeri legati da disolfuro o varianti conformazionali; si consiglia di testare entrambe le condizioni.
• Per le applicazioni ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento per il CFD in fluidi biologici come siero o plasma. Le coppie di anticorpi e le concentrazioni ottimali devono essere determinate empiricamente.
• A causa della natura secreta del CFD, la preparazione del campione potrebbe richiedere attenzione per prevenire la degradazione; si consiglia l'aggiunta di inibitori delle proteasi e la lavorazione dei campioni a basse temperature.

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