Anti-Connexina 43 Coniglio PolymAb® per WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P17302

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Connexina 43 (GJA1)

• La proteina alfa-1 delle giunzioni gap, nota anche come Connexina-43 (Cx43), è codificata dal gene GJA1. È il componente strutturale delle giunzioni gap, formando canali intercellulari che permettono lo scambio diretto di ioni, metaboliti e piccole molecole di segnalazione tra cellule adiacenti.
• I canali funzionali sono connessoni esamerici omotipici ed eterotipici, regolati dalla voltaggio transgiunzionale. La Cx43 contribuisce a diversi processi fisiologici tra cui il riciclo del potassio nella coclea (udito), la regolazione della capacità funzionale vescicale tramite sensibilizzazione agli stimoli colinergici e la corretta conduzione del miocardio ventricolare e morfogenesi cardiaca.
• Un regolatore negativo della crescita cellulare attraverso la modulazione dell'espressione e della localizzazione di NOV.
• Mediatore critico della segnalazione immunitaria innata intercellulare: in seguito all'infezione virale, i canali Cx43 traslocano i secondi messaggi 2',3'-cGAMP e 2',5'-oligoadenilati (2-5A) dalle cellule infette ai macrofagi e ai vicini non infetti, amplificando così la risposta immunitaria antivirale. Riferimenti correlati: PMID:24077100 PMID:31992625 PMID:40010341
• Localizzato subcellularmente prevalentemente alla membrana cellulare e alle placche delle giunzioni gap, con presenza aggiuntiva nel reticolo endoplasmatico.
• Espressione tissutale: abbondante nei dischi intercalati del muscolo cardiaco, nella coclea fetale e nei cheratinociti epidermici.
• Le modifiche post-traduzionali includono fosforilazione, acetilazione, S-nitrosilazione e ubiquitinazione; queste modificano l'assemblaggio del canale, il gating e il ricambio. Associata a malattie come la displasia oculodentodigitale, la cheratoderma palmoplantare e le cataratte congenite.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre gli amminoacidi 300–382 all'interno della coda C-terminale della Cx43 umana. Questa regione è citoplasmatica e contiene molteplici siti di fosforilazione regolatori; pertanto l'anticorpo può riconoscere multiple isoforme fosforilate o la Cx43 totale a seconda dello stato della proteina bersaglio.
• Per il Western blot (WB), ci si aspetta una banda principale intorno a 43 kDa; tuttavia, è noto che la Cx43 migra come bande multiple a causa della fosforilazione, il che può essere risolto con un'attenta preparazione del campione e elettroforesi su gel.
• Nell'immunofluorescenza (IF/ICC, IF-P), si dovrebbe osservare una colorazione membranosa punctata tipica delle placche delle giunzioni gap. Le condizioni di permeabilizzazione e fissazione potrebbero richiedere ottimizzazione per il tipo specifico di cellula o tessuto.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo di una proteina ricombinante Cx43 o un peptide che comprenda la sequenza dell'immunogeno come controllo positivo per validare il legame dell'anticorpo.

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