Anticorpo Monoclonale Anti-COPA per WB, IHC-P, ELISA - P536362

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del COPA

• COPA codifica per la subunità alfa del coatomero (alpha-COP), un componente fondamentale del complesso del coatomero che riveste le vescicole COPI coinvolte nel traffico proteico tra il reticolo endoplasmatico e l'apparato di Golgi.
• Il complesso del coatomero si lega a motivi dilisina sulle proteine cargo e media il trasporto retrogrado da Golgi a RE, essenziale per mantenere l'integrità strutturale e la funzione di Golgi.
• COPA è un membro della famiglia delle proteine a ripetizione WD, caratterizzato da domini WD40 multipli che facilitano le interazioni proteina-proteina all'interno del complesso del coatomero.
• La proteina viene reclutata sulle membrane di Golgi dai fattori di ADP-ribosilazione (ARF), piccole GTPasi, ed è coinvolta nel riciclaggio endocitico dei recettori delle LDL.
• COPA viene scisso per produrre il peptide biologicamente attivo xenina, che stimola la secrezione esocrina del pancreas e modula la motilità gastrointestinale tramite l'interazione con il recettore della neurotensina.
• La localizzazione subcellulare include il citoplasma, la membrana dell'apparato di Golgi, la membrana delle vescicole rivestite da COPI e forme secretorie; è espresso uniformemente in una vasta gamma di tessuti, con la xenina specificamente trovata nella mucosa gastrica, duodenale e digiunale.
• Le modifiche post-traduzionali includono la fosforilazione e la metilazione, con lo splicing alternativo e la modifica dell'RNA che generano isoforme che potrebbero essere collegate a varianti patologiche.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno mira alla regione N-terminale (amminoacidi 1-100) del COPA umano; questa progettazione può conferire specificità dell'epitopo a questa regione. Considerare questo quando si interpretano i risultati attraverso specie o isoforme.
• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto è 138 kDa; utilizzare una percentuale di gel appropriata (es. 6-8% SDS-PAGE) e tempi di trasferimento estesi per garantire un efficiente trasferimento sulla membrana delle proteine ad alto peso molecolare.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene dovrebbero essere ottimizzate; il COPA è espresso nel citoplasma e nel Golgi, quindi ci si aspetta una colorazione perinucleare punteggiata riflettiva della localizzazione di Golgi.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per catturare o rilevare il COPA ricombinante o frammenti peptidici; convalidare con standard noti e considerare la reattività incrociata con omologhi di topo e ratto.
• I dati di reattività incrociata indicano reattività con umano, topo e ratto; tuttavia, raccomandiamo di confermare la reattività nel vostro sistema sperimentale specifico prima dell'uso su larga scala.

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