Anticorpo monoclonale coniglio anti-COPB2 per WB, IF/ICC, ELISA - P35606

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di COPB2

• COPB2 codifica per la subunità coatomere beta'-COP (beta'-coat protein, p102), un componente principale del complesso coatomere COPI coinvolto nel traffico vescicolare intracellulare.
• Il complesso coatomere si lega a motivi dilisina e si associa in modo reversibile alle vescicole del Golgi non rivestite di clatrina, mediando il trasporto proteico biosintetico dall'ER attraverso il Golgi fino alla rete trans-Golgi.
• COPB2 è essenziale per la gemmazione del Golgi e il trasporto retrogrado Golgi-ER delle proteine marcate con dilisina, mantenendo l'integrità strutturale del Golgi e regolando la lavorazione, l'attività e il riciclaggio endocitico dei recettori delle LDL.
• COPB2 funziona come proteina di legame selettiva (RACK) per la chinasi C epsilon tipo, collegando il traffico di membrana con la segnalazione cellulare attraverso il legame dipendente da GTP alle membrane del Golgi.
• La proteina si localizza prevalentemente nel citoplasma, nella membrana dell'apparato di Golgi e nelle membrane delle vescicole rivestite da COPI, sottolineando il suo ruolo nella formazione delle vescicole COPI e nell'ordinamento del carico.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono modulare l'assemblaggio del coatomere, la stabilità o le interazioni con il carico e i fattori regolatori.
• Le mutazioni in COPB2 sono associate alla microcefalia primaria (MCPH19) e all'osteoporosi, evidenziando i suoi ruoli essenziali nella divisione cellulare e nell'omeostasi ossea.
• La proteina contiene domini a ripetizione WD, che consentono interazioni proteina-proteina critiche per l'integrità e la funzione del complesso coatomere.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno (aa 657-906) copre la regione C-terminale a ripetizione WD; considerare che l'anticorpo può riconoscere motivi strutturali conservati quando si valuta la reattività crociata tra le specie.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è 102 kDa; utilizzare una percentuale di gel appropriata (es. 8% SDS-PAGE) e ottimizzare le condizioni di trasferimento per proteine ad alto peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, ci si aspetta un pattern di colorazione perinucleare, simile al Golgi; è raccomandata la colorazione simultanea con un marcatore cis-Golgi (es. GM130) per la validazione.
• Per l'ELISA, utilizzare l'immunogeno ricombinante come controllo positivo e standardizzare le condizioni dell'analisi con appropriati tamponi di blocco e lavaggio.
• Verificare la specificità dell'anticorpo utilizzando lisati cellulari con knockout o knockdown di COPB2 se disponibili, poiché COPB2 è essenziale e la sua deplezione può influenzare la vitalità cellulare.
• Per preservare l'attività dell'anticorpo, aliquotare e conservare a -20°C o inferiore; evitare cicli ripetuti di congelamento-scongelamento e l'esposizione prolungata alla temperatura ambiente (spedito in borsa del ghiaccio).

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