Anticorpo policlonale rabbit Anti-COPB2 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P35606

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di COPB2

• COPB2 è la subunità beta' del coatomer, nota anche come beta'-COP o p102, ed è codificata dal gene COPB2.
• È un componente centrale del complesso coatomer, un complesso proteico citosolico che si lega ai motivi a dilisina e si associa in modo reversibile alle vescicole golgiane non rivestite da clatrina.
• Il complesso coatomer è necessario per la gemmazione dalle membrane del Golgi e media sia il trasporto biosintetico anterogrado dall'RE alla rete trans-golgiana, sia il trasporto retrogrado dal Golgi all'RE delle proteine marcate con dilisina.
• COPB2 è essenziale per l'integrità strutturale dell'apparato di Golgi e influenza la processazione, l'attività e il riciclo endocitico dei recettori LDL.
• Il complesso coatomer viene reclutato sulle membrane del Golgi tramite interazione GTP-dipendente con i fattori di ADP-ribosilazione (ARF) e COPB2 può funzionare come proteina di legame selettiva (RACK) per la protein chinasi C di tipo epsilon.
• Subcellolarmente, COPB2 si localizza nel citoplasma, nel citosol, sulla membrana dell'apparato di Golgi e sulle membrane delle vescicole rivestite da COPI.
• La proteina ha un peso molecolare di circa 102 kDa e contiene domini a ripetizione WD; inoltre subisce modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (amminoacidi 657-906), quindi l'anticorpo può riconoscere epitopi all'interno di questo dominio; tenere conto di questo aspetto nella progettazione di esperimenti di mappatura degli epitopi o di troncazione.
• Per il western blotting, è prevista una banda vicino a 102 kDa; convalidare la specificità con controlli appropriati, poiché COPB2 è espresso in modo ubiquitario.
• Nell'IHC-P, le condizioni di recupero dell'antigene (ad esempio, tampone citrato pH 6.0) devono essere ottimizzate; è prevista colorazione nella regione citoplasmatica e golgiana perinucleare.
• Per IF/ICC, si raccomanda la permeabilizzazione con Triton X-100 o digitonina per accedere ai compartimenti intracellulari; la colocalizzazione con marcatori del Golgi può confermare la specificità.
• L'anticorpo presenta reattività incrociata riportata con gli ortologhi di topo e ratto; tuttavia, l'omologia di sequenza nella regione dell'immunogeno deve essere verificata per altre specie prima dell'uso.

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