Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-COX IV per WB, IHC-P, ELISA - P13073

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della COX IV

• La subunità 4 isoforma 1 del citocromo c ossidasi (COX IV-1) è una subunità codificata nel nucleo del complesso IV (citocromo c ossidasi), l'enzima terminale della catena di trasporto degli elettroni mitocondriale.
• Gioca un ruolo critico nella fosforilazione ossidativa contribuendo all'assemblaggio e alla regolazione dell'oloenzima, che catalizza la riduzione dell'ossigeno molecolare in acqua.
• L'enzima accoppia il trasferimento di elettroni dal citocromo c all'ossigeno con la traslocazione dei protoni attraverso la membrana mitocondriale interna, generando il gradiente di protoni essenziale per la sintesi di ATP.
• La COX IV-1 è codificata dal gene COX4I1 ed è espressa ubiquitariamente nei tessuti umani, con un peso molecolare di circa 19,5 kDa per la proteina matura.
• La proteina è ancorata alla membrana interna mitocondriale ed è sintetizzata con un peptide di transito clivabile che dirige l'importazione mitocondriale.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione e fosforilazione, che possono modulare l'attività e l'assemblaggio del complesso IV.
• Le mutazioni in COX4I1 sono collegate alla deficienza del complesso IV mitocondriale, tipo nucleare 16 (MC4DN16), un grave disturbo multisistemico.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno utilizzato (peptide N-terminale all'interno degli amminoacidi 1–100) suggerisce il riconoscimento dell'epitopo in una regione conservata tra umano, topo e ratto, supportando la cross-reattività osservata. Considerare questo durante la progettazione di saggi di rilevamento specifici per isoforma.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto della COX IV è di ~20 kDa; validare il rilevamento utilizzando lisati di controllo positivi appropriati (es. frazioni mitocondriali da HeLa, HEK293 o fegato di roditore).
• Nell'immunoistochimica (paraffina), devono essere applicati metodi standard di recupero dell'antigene (tampone citrato, pH 6.0, o EDTA, pH 9.0) e blocco della perossidasi endogena; i pattern di espressione tessuto-specifici potrebbero richiedere ottimizzazione.
• Quando si esegue un ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o rilevamento per COX IV nativa o ricombinante; la cross-reattività con l'olocomplesso del complesso IV o con subassemblaggi potrebbe influenzare la progettazione del saggio—si raccomanda la validazione empirica.
• Includere sempre controlli abbinati per specie e, se si studiano modelli di malattia, confermare la presenza di mutazioni che potrebbero alterare l'accessibilità dell'epitopo.

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