Anticorpo monoclonale di coniglio anti-COX2/PTGS2 per WB, IHC-P, ELISA - P35354

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di COX2/PTGS2

• COX2/PTGS2 (Prostaglandina G/H sintasi 2) è un enzima inducibile a doppia funzione che catalizza la cicloossigenazione dell'acido arachidonico in prostaglandina G2 (PGG2) e la sua successiva perossidazione in prostaglandina H2 (PGH2), il precursore centrale di tutti i prostanoidi. Riferimenti correlati: PMID:16373578 PMID:22942274 PMID:26859324
• Oltre all'arachidonato, la COX2 ossigena altri acidi grassi polinsaturi come l'acido diomo-γ-linolenico (DGLA) e l'acido eicosapentaenoico (EPA) per produrre serie di prostanoidi alternative, contribuendo a diversi profili di mediatori lipidici. Riferimenti correlati: PMID:11939906 PMID:19540099
• Oltre alla classica sintesi dei prostanoidi, la COX2 partecipa alla generazione di mediatori pro-risolutivi specializzati (SPM), tra cui le resolvine di serie D dall'acido docosaesaenoico (DHA) e le resolvine di serie E dall'EPA, svolgendo un ruolo chiave nella risoluzione dell'infiammazione. Riferimenti correlati: PMID:12391014 PMID:21206090
• La COX2 è localizzata prevalentemente nelle membrane del reticolo endoplasmatico, nei microsomi e nelle membrane nucleari sia interna che esterna, posizionandola in siti intracellulari chiave per la segnalazione degli eicosanoidi.
• L'enzima richiede cofattori eme e ferro per le sue doppie attività ed è soggetto a modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione, S-nitrosilazione e formazione di ponti disolfuro, che possono regolarne la funzione.
• La COX2 metabolizza il 2-arachidonoil glicerolo in esteri glicerilici dei prostanoidi, un processo legato alla percezione del dolore, e può anche ossigenare l'acido linoleico in idrossioctadecadienoati (HODE). Riferimenti correlati: PMID:22942274

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno è progettato contro la regione C-terminale (aa 505-604) della COX2 umana, un'area con elevata omologia di sequenza tra uomo, topo e ratto, coerente con la reattività crociata riportata.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di ~69 kDa; assicurarsi di utilizzare una percentuale di gel e condizioni di trasferimento appropriate. Validare con controlli positivi appropriati (ad es. lisati cellulari indotti da COX2) e considerare la natura inducibile della proteina.
• In IHC-P, potrebbe essere necessario il recupero dell'antigene; ottimizzare le condizioni di recupero per il tessuto specifico e il metodo di fissazione. Si raccomanda di includere sia controlli positivi (ad es. tessuto infiammato) che negativi (a basso contenuto di COX2).
• Per l'ELISA, confermare il riconoscimento dell'epitopo peptidico nel formato del saggio e considerare l'utilizzo di proteina COX2 ricombinante o peptide come standard, se disponibile.

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