Anticorpo policlonale di coniglio anti-COX5A per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P20674

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di COX5A

• COX5A codifica per la subunità 5A della citocromo c ossidasi, mitocondriale, nota anche come polipeptide Va della citocromo c ossidasi.
• È un componente critico del complesso IV (citocromo c ossidasi), l'enzima terminale della catena di trasporto degli elettroni mitocondriale.
• Il complesso IV catalizza la riduzione dell'ossigeno molecolare ad acqua, utilizzando elettroni dal citocromo c ridotto, contribuendo al gradiente protonico che guida la sintesi di ATP.
• La subunità è ancorata alla membrana mitocondriale interna, con un peptide di transito che ne dirige l'importazione nell'organello.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione e coniugazione con ubiquitina, suggerendo ruoli regolatori nella funzione mitocondriale.
• Le mutazioni in COX5A sono legate a malattie mitocondriali primarie, evidenziando il suo ruolo essenziale nel metabolismo energetico cellulare.
• La proteina contiene eme A e centri di rame come cofattori, essenziali per il trasferimento di elettroni all'interno del complesso IV.
• COX5A ha un peso molecolare maturo di circa 17 kDa, coerente con la sua rilevazione tramite western blot.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• Per il western blot (WB), è prevista una banda predominante vicino a 17 kDa in campioni ricchi di mitocondri; ottimizzare i controlli di caricamento e validare in tessuti o linee cellulari pertinenti.
• Quando si esegue l'immunoistochimica (IHC-P), considerare il recupero dell'antigene indotto dal calore utilizzando tampone citrato o EDTA e confermare la specificità della colorazione con controlli appropriati.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), permeabilizzare le cellule per accedere al compartimento mitocondriale; la co-colorazione con un marcatore mitocondriale può aiutare a verificare la localizzazione.
• Nelle applicazioni ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; le condizioni del saggio come la concentrazione di rivestimento e il bloccaggio dovrebbero essere ottimizzate individualmente.
• La reattività crociata riportata con topo e ratto consente studi traslazionali, ma il riconoscimento dell'epitopo specifico della specie dovrebbe essere confermato nel proprio modello sperimentale.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti non è garantita; per saggi quantitativi o regolamentati, validare ogni nuovo lotto rispetto alle prestazioni precedenti.

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