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Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-COX5B per WB - P10606

Monoclonal Antibodies

Anticorpo Monoclonale Coniglio Anti-COX5B per WB - P10606

Numero articolo : CM0006644

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Applicazione
WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA
Reattività incrociata
Uomo, Topo, Ratto
Peso proteico
13 kDa
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Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Parametro Valore
Nome Prodotto COX5B Coniglio mAb
Osservazioni/Alias COX5B; COXVB; subunità citocromo c ossidasi 5B
Specie Umano
Gene ID (Umano) 1329
Immunogeno Proteina di fusione ricombinante contenente una sequenza corrispondente agli amminoacidi 29-129 del COX5B umano (NP_001853.2)
Sorgente Coniglio
Categoria Anticorpi Monoclonali
Applicazione WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA
Reattività Crociata Umano, Mouse, Ratto
SWISS P10606
Peso Proteico 13 kDa
Spedizione Borsa del ghiaccio

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione del COX5B

  • COX5B (subunità citocromo c ossidasi 5B) è una subunità codificata nel nucleo del complesso mitocondriale IV (citocromo c ossidasi), l'enzima terminale della catena di trasporto degli elettroni.
  • È un componente del complesso multi-subunità citocromo c ossidasi che catalizza la riduzione dell'ossigeno molecolare in acqua, accoppiando questa reazione al pompaggio di protoni attraverso la membrana mitocondriale interna.
  • La proteina COX5B viene sintetizzata con un peptide di transito mitocondriale, che viene clivato dopo l'importazione nel mitocondrio, producendo una subunità matura che si integra nella membrana interna.
  • La localizzazione subcellulare è limitata alla membrana interna mitocondriale, dove contribuisce all'integrità strutturale e funzionale del complesso IV.
  • Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione e la proteina matura contiene un sito di legame dello zinco, come indicato dalla presenza di uno ione zinco nella struttura cristallina.
  • Il peso molecolare teorico del COX5B umano maturo è di circa 13,7 kDa, coerente con la banda di 13 kDa osservata su SDS-PAGE.
  • Come subunità principale della catena respiratoria, il COX5B è essenziale per una fosforilazione ossidativa efficiente e la produzione di ATP, e la sua espressione è spesso utilizzata come marcatore per la massa e l'attività mitocondriale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

  • L'immunogeno copre gli amminoacidi 29–129 del COX5B umano, che corrisponde alla proteina matura processata priva del peptide di targeting mitocondriale, generando probabilmente anticorpi che riconoscono la forma endogena processata.
  • Per il Western blotting, è prevista una banda intorno a 13 kDa nei lisati di tessuti ricchi di mitocondri umani, murini e di ratto (es. cuore, muscolo scheletrico, fegato). Utilizzare un campione con frazione mitocondriale arricchita per una rilevazione ottimale.
  • Per l'immunoistochimica (IHC-P) e l'immunofluorescenza (IF/ICC), la colorazione dovrebbe mostrare un pattern citoplasmatico puntiforme coerente con la localizzazione mitocondriale. Si raccomanda una controcolorazione con un marcatore mitocondriale per la validazione.
  • Negli esperimenti di immunoprecipitazione (IP), l'anticorpo può co-precipitare altre subunità del complesso IV; considerare l'uso di detergenti delicati per preservare l'integrità del complesso nativo.
  • La reattività ELISA può essere utilizzata per la rilevazione quantitativa del COX5B in lisati cellulari o tissutali, ma le prestazioni devono essere validate con standard noti.
  • La reattività crociata con mouse e ratto è stata confermata, ma verificare sempre la reattività specifica per la specie nel proprio sistema sperimentale a causa di potenziali variazioni di sequenza.

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