Anticorpo policlonale di coniglio anti-COX8A per WB ed ELISA - P10176

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della subunità 8A della citocromo c ossidasi

• COX8A codifica per la subunità 8A della citocromo c ossidasi, un polipeptide codificato dal nucleo del complesso IV della catena respiratoria mitocondriale (noto anche come polipeptide VIII-fegato/cuore della citocromo c ossidasi e COX8-2).
• Come componente della citocromo c ossidasi (complesso IV), catalizza la riduzione terminale dell'ossigeno ad acqua nella catena di trasporto degli elettroni, accoppiando il trasferimento di elettroni alla traslocazione di protoni attraverso la membrana mitocondriale interna per guidare la sintesi di ATP.
• Il gene COX8A appartiene a una famiglia di subunità codificate dal nucleo che modulano strutturalmente il nucleo catalitico del complesso IV; isoforme alternative possono derivare da geni distinti come COX8C.
• La proteina si localizza sulla membrana mitocondriale interna tramite un'elica transmembrana; viene sintetizzata come precursore con un peptide di transito N-terminale che viene rimosso dopo l'importazione mitocondriale per produrre la forma matura di circa 8 kDa.
• L'ubiquitinazione (coniugazione Ubl) è stata identificata come una modifica post-traduzionale, che potenzialmente regola la stabilità di COX8A o il suo assemblaggio nel complesso.
• Le mutazioni in COX8A sono collegate a malattie mitocondriali primarie, nello specifico al deficit del complesso IV mitocondriale di tipo nucleare 15 (MC4DN15), evidenziando il suo ruolo essenziale nella fosforilazione ossidativa.
• Ampiamente espressa nei tessuti umani, COX8A supporta la funzione di housekeeping della respirazione mitocondriale in diversi tipi cellulari.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai 69 amminoacidi N-terminali della COX8A umana; si consiglia di utilizzare lisati arricchiti di mitocondri per migliorare la sensibilità di rilevamento per questa proteina di membrana interna a bassa abbondanza.
• Per il Western blotting, utilizzare un gel ad alta percentuale (es. 15% o gradiente) adatto a risolvere proteine di circa 8 kDa e validare la banda rispetto al peso molecolare previsto (UniProt: 7579 Da) con marcatori mitocondriali.
• Nelle applicazioni ELISA, la natura policlonale consente il riconoscimento di epitopi multipli; eseguire titolazioni a scacchiera per determinare le concentrazioni ottimali di rivestimento dell'anticorpo e dell'antigene.
• È indicata la reattività crociata con umano e topo; per altre specie, allineare la sequenza dell'immunogeno con la proteina target per prevedere la reattività prima dell'uso sperimentale.
• Data la localizzazione mitocondriale, il pre-trattamento dei campioni con detergenti blandi può migliorare l'accessibilità dell'epitopo, sebbene sia consigliato un test empirico.

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