Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CPS1 per WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P31327

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del CPS1

• CPS1, noto anche come Carbamoil-fosfato sintetasi I, è un enzima mitocondriale che catalizza il primo passo impegnativo del ciclo dell'urea, convertendo l'ammoniaca in carbamoil fosfato, essenziale per la detossificazione dell'ammoniaca negli animali ureotelici.
• Svolge un ruolo critico nella rimozione dell'ammoniaca in eccesso dalle cellule, principalmente nel fegato e nell'intestino tenue, dove è altamente espresso.
• La proteina si localizza nella matrice mitocondriale, ma è stata rilevata anche nel nucleo, nel nucleolo e nella membrana cellulare, suggerendo ulteriori funzioni non canoniche.
• CPS1 subisce varie modificazioni post-traduzionali, tra cui acetilazione e fosforilazione, ed esibisce splicing alternativo, che possono regolare la sua attività o localizzazione.
• Come enzima allosterico che lega l'ATP, appartiene alla famiglia delle ligasi ed è un componente chiave del ciclo dell'urea, con mutazioni collegate a varianti della malattia.
• La proteina matura ha un peso molecolare di circa 165 kDa, coerente con il suo precursore di 164939 Da dopo la clivaggio del peptide di transito mitocondriale.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot, il rilevamento del bersaglio a ~165 kDa richiede una concentrazione di gel appropriata (es. 6-8% SDS-PAGE) e tempi di trasferimento estesi a causa dell'elevato peso molecolare.
• Nei protocolli di immunofluorescenza (IF-P), dovrebbero essere determinate condizioni ottimali di fissazione e permeabilizzazione per preservare la struttura mitocondriale consentendo al contempo l'accesso dell'anticorpo.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), il pH e il metodo di recupero dell'antigene dovrebbero essere validati; le sezioni tissutali di fegato e intestino tenue servono come controlli positivi appropriati in base alla specificità tissutale.

Dato che l'immunogeno è un peptide sintetico dai residui 100-200, la specificità può essere confermata da saggi di competizione peptidica o analisi Western blot utilizzando lisati cellulari CPS1 knockout, se disponibili.

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