Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-CPS1 per WB, IF/ICC, ELISA - P31327

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della CPS1

• La CPS1 (Carbamoil-fosfato sintasi [ammoniaca], mitocondriale) è un enzima chiave del ciclo dell'urea che catalizza la sintesi ATP-dipendente del carbamoil-fosfato da ammoniaca e bicarbonato, essenziale per la detossificazione dell'ammoniaca negli animali ureotelici.
• La proteina è espressa principalmente nel fegato e nell'intestino tenue, in linea con il suo ruolo centrale nel metabolismo dell'azoto.
• La CPS1 si localizza prevalentemente nella matrice mitocondriale, ma è stata rilevata anche nel nucleo, nel nucleolo e nella membrana cellulare, suggerendo ulteriori funzioni non canoniche.
• Sono riportate modificazioni post-traduzionali tra cui acetilazione, fosforilazione e glicosilazione, che possono regolare l'attività enzimatica o la localizzazione.
• La CPS1 è un enzima allosterico e un membro della famiglia delle ligasi, contenente siti di legame per l'ATP cruciali per la sua funzione catalitica.
• Lo splicing alternativo produce più isoforme, e mutazioni nella CPS1 causano la deficienza della carbamoil-fosfato sintetasi I, un grave disturbo del ciclo dell'urea.
• Una struttura 3D risolta fornisce informazioni sull'architettura dei domini dell'enzima e sui suoi meccanismi regolatori.
• La proteina matura ha un peso molecolare di circa 165 kDa (UniProt: 164.939 Da).

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno copre la regione centrale (aa 750-970) della CPS1 umana, mirando a un'area potenzialmente conservata tra le specie; verificare la reattività incrociata nel proprio specifico sistema di campionamento.
• Per il Western blot (WB), attendersi una banda intorno ai 165 kDa; utilizzare marcatori di peso molecolare appropriati e considerare controlli di caricamento come GAPDH o beta-actina per la normalizzazione.
• Per l'immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), ottimizzare la fissazione (es. PFA 4%) e la permeabilizzazione (es. Triton X-100 0,1%) per rilevare la localizzazione mitocondriale; se necessario, effettuare una co-colorazione con marcatori mitocondriali.
• Nelle applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo e utilizzare un antigene di rivestimento adeguato; l'immunogeno ricombinante può fungere da controllo positivo.

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