Anticorpo policlonale di coniglio anti-CRACR2A per WB, IHC-P, ELISA - Q9BSW2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CRACR2A

• CRACR2A, noto anche come proteina 4B contenente dominio di legazione del calcio EF-hand (EFCAB4B) o proteina correlata a Ras Rab-46 (RAB46), è una proteina legante il calcio con attività GTPasi che svolge un duplice ruolo nell'entrata di calcio mediata da riserva cellulare (SOCE) e nel traffico intracellulare. Riferimenti correlati: PMID:27016526
• Nei linfociti T, CRACR2A funziona come sensore citoplasmatico del calcio che favorisce l'aggregazione di ORAI1 e STIM1 nelle giunzioni tra reticolo endoplasmatico e membrana plasmatica, promuovendo l'attivazione dei canali CRAC. Dopo l'influsso di calcio, si dissocia dal complesso per regolare la stabilità del canale. Riferimenti correlati: PMID:27016526
• Come Rab GTPasi, CRACR2A media il trasporto retrogrado dei corpi di Weibel-Palade (WPB) verso il centro organizzatore dei microtubuli (MTOC) nelle cellule endoteliali in risposta alla stimolazione con istamina, agendo in modo indipendente dal calcio. Riferimenti correlati: PMID:31092558
• CRACR2A funziona anche come proteina adattatrice della dineina regolata dal calcio, attivando il trasporto mediato dalla dineina e regolando il traffico endosomiale di CD47. Riferimenti correlati: PMID:30814157
• Collega le vie di segnalazione del TCR localizzandosi alla sinapsi immunologica dopo l'attivazione dei linfociti T, dove interagisce con VAV1 per attivare le cascate di segnalazione a valle Ca2+-NFAT e JNK. Riferimenti correlati: PMID:27016526
• Subcellulare, CRACR2A si trova nel citoplasma, sulla membrana plasmatica, nell'apparato di Golgi, nella rete trans-Golgi ed è associato alle vescicole e al centro organizzatore dei microtubuli. La sua localizzazione cambia in base allo stato di attivazione e al tipo cellulare.
• L'espressione tissutale include linee di linfociti T come Jurkat e cellule endoteliali, con localizzazione specifica nei corpi di Weibel-Palade nelle cellule endoteliali. Riferimenti correlati: PMID:25475730, PMID:31092558, PMID:27016526, PMID:30814157
• La proteina contiene domini EF-hand per la legazione del calcio, un dominio GTPasi e subisce prenilazione (come indicato dalle parole chiave), suggerendo un'associazione con la membrana. Esistono più isoforme dovute allo splicing alternativo.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione N-terminale (amminoacidi 1-200) di CRACR2A umano, che può bersagliare epitopi conservati tra le diverse isoforme. Si consiglia di verificare la rilevazione isoforma-specifica nel proprio sistema sperimentale.
• Per il Western blotting, il peso molecolare previsto è di circa 83 kDa. Quando si analizza CRACR2A endogeno, prestare attenzione a possibili modifiche post-traduzionali o varianti di splicing che possono alterare la migrazione.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), le condizioni di recupero dell'antigene devono essere ottimizzate per il tessuto specifico e il legame dell'anticorpo. Validare i pattern di colorazione utilizzando controlli positivi (es. tessuti ricchi di linfociti T) e negativi appropriati.
• L'anticorpo ha reattività incrociata con campioni di topo secondo le specifiche del fornitore, ma consigliamo di validare la specificità nei tessuti o nelle linee cellulari di topo prima dell'uso.
• Per applicazioni ELISA, consigliamo di utilizzare un sistema di rilevazione secondario compatibile con gli anticorpi policlonali di coniglio; titrare l'anticorpo per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.

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