Anticorpo policlonale anti-CRB1 per WB, IHC-P, ELISA - P82279

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della proteina homolog 1 di crumbs

• La proteina homolog 1 di crumbs (CRB1) è un membro della famiglia delle proteine crumbs, caratterizzata da domini extracellulari simili all'EGF e motivi intracellulari, e svolge un ruolo chiave nella polarità e nell'adesione cellulare.
• CRB1 è essenziale per la morfogenesi dei fotorecettori nella retina, dove contribuisce a mantenere la polarità apicale-basale e le giunzioni intercellulari tra i fotorecettori e le cellule gliali di Müller (per analogia).
• La proteina si localizza sulla membrana cellulare apicale, nei segmenti esterni e interni dei fotorecettori, ed è inoltre rilevata in forme secrete, coerentemente con la sua funzione nella matrice extracellulare e nei contatti cellula-cellula.
• CRB1 è espresso preferenzialmente nella retina, con un'ulteriore espressione nel cervello, nei testicoli, nel cervello fetale e nell'occhio fetale. Nella retina, è concentrato nella membrana limitante esterna e in posizione apicale rispetto alle giunzioni aderenti. Riferimenti correlati: PMID:15914641
• Strutturalmente, CRB1 contiene molteplici ripetizioni simili all'EGF con potenziale capacità di legare il calcio e formare ponti disolfuro, un peptide segnale, un dominio transmembrana e una breve coda citoplasmatica; inoltre, è soggetto a splicing alternativo che genera isoforme (CRB1-A, CRB1-B, CRB1-C).
• Le mutazioni nel gene CRB1 sono associate a gravi distrofie retiniche, tra cui l'amaurosi congenita di Leber 8 (LCA8) e la retinite pigmentosa 12 (RP12), sottolineandone il ruolo critico nella salute della retina.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 28–133 nella regione extracellulare N-terminale, suggerendo che l'anticorpo rilevi probabilmente CRB1 a lunghezza intera e possibilmente le sue isoforme. Si consiglia di convalidare la specificità utilizzando controlli specifici per le isoforme.
• Per il Western blot, il peso molecolare previsto è di circa 154 kDa. A causa della glicosilazione e dello splicing alternativo, possono comparire bande aggiuntive; ottimizzare la percentuale del gel e le condizioni di trasferimento per le proteine di grandi dimensioni.
• Per l'immunoistochimica (IHC-P), le sezioni di tessuto retinico umano o murino sono controlli positivi ideali. Potrebbero essere necessari il recupero antigenico e la titolazione per ottenere un segnale ottimale.
• Questo anticorpo policlonale può essere utilizzato nei saggi ELISA; assicurarsi di includere controlli negativi appropriati per confermare il legame al bersaglio.

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