Anticorpo monoclonale coniglio anti-CRBN per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q96SW2

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della CRBN

• La proteina cereblona (CRBN), codificata dal gene CRBN, è nota anche come MRT2 o MRT2A. Funziona come componente di riconoscimento del substrato del complesso ligasi E3 ubiquitina DCX (DDB1-CUL4-X-box), mirando a proteine specifiche per l'ubiquitinazione e la successiva degradazione proteasomica. Riferimenti correlati: PMID:26990986, PMID:33009960
• Attraverso la sua attività di ligasi ubiquitina, la CRBN regola processi chiave dello sviluppo e di segnalazione. È essenziale per la normale crescita degli arti mediata dal fattore di crescita dei fibroblasti FGF8, come dimostrato in studi che collegano le mutazioni della CRBN a difetti congeniti degli arti. Riferimenti correlati: PMID:20223979, PMID:24328678, PMID:25043012
• Nel sistema nervoso, la CRBN mantiene funzioni cognitive come la memoria e l'apprendimento regolando negativamente i canali del potassio attivati dal calcio a grande conduttanza (BK). Interagisce con KCNT1 per controllare l'assemblaggio dei canali BK e l'espressione di superficie neuronale, influenzando il rilascio presinaptico di glutammato. Riferimenti correlati: PMID:18414909, PMID:29530986
• La CRBN svolge anche un ruolo regolatorio negativo nell'immunità innata inibendo la segnalazione del recettore Toll-like 4 (TLR4). Si lega a TRAF6 ed ECSIT, bloccando l'ubiquitinazione di ECSIT, un passaggio critico nella trasduzione del segnale TLR4. Riferimenti correlati: PMID:31620128
• A livello subcellulare, la CRBN si trova nel citoplasma, nel nucleo ed è associata alla membrana. È ampiamente espressa nei tessuti ma mostra la massima espressione nel cervello.
• Caratteristiche aggiuntive includono la sua annotazione come proteina legante lo zinco e fosfoproteina. Lo splicing alternativo produce multiple isoforme e le mutazioni nella CRBN sono associate a disabilità intellettiva autosomica recessiva.

Guida Sperimentale e Suggerimenti Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 1-280 della CRBN umana (proteina a lunghezza intera ~51 kDa). Per il Western blotting, considerare il caricamento di 20-30 µg di lisato proteico; la banda prevista è a circa 51 kDa in condizioni riducenti.
• Questo anticorpo è raccomandato per WB, IHC-P, IF/ICC ed ELISA. Per IHC-P, potrebbero essere necessari appropriati metodi di recupero dell'antigene (es. tampone citrato mediato dal calore, pH 6.0); validare in sezioni tissutali con nota espressione di CRBN (es. cervello, germogli degli arti).
• La reattività crociata con topo e ratto è stata confermata, suggerendo una conservazione dell'epitopo tra le specie. Quando si utilizzano queste specie, ottimizzare le condizioni e confermare la reattività nel modello sperimentale specifico.
• Dato il ruolo della CRBN nel sistema ubiquitina-proteasoma, il trattamento con inibitori del proteasoma (es. MG132) può stabilizzare le proteine bersaglio e influenzare il rilevamento della CRBN negli saggi di degradazione.

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