Anticorpo policlonale anti-CREB3 di coniglio per WB, IF/ICC, ELISA - O43889

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CREB3

• CREB3 (proteina 3 che lega l'elemento responsivo dell'AMP ciclico), noto anche come LZIP o LUMAN, è un fattore di trascrizione legato al reticolo endoplasmatico (ER) appartenente alla famiglia CREB/ATF, caratterizzato da un dominio di attivazione trascrizionale N-terminale e una leucina zipper C-terminale.
• Si lega direttamente al DNA nelle sequenze CRE (5'-GTGACGT[AG][AG]-3') e C/EBP per attivare la trascrizione, svolgendo un ruolo cruciale nella risposta alle proteine unfolded (UPR) promuovendo la sopravvivenza cellulare durante lo stress dell'ER. Riferimenti correlati: PMID:10984507, PMID:15845366, PMID:16940180
• In seguito a stress dell'ER, CREB3 subisce una proteolisi intramembranare regolata (RIP), che rilascia il suo frammento N-terminale che si trasloca nel nucleo per attivare geni bersaglio della UPR come HERPUD1.
• Subcellularemente, CREB3 si localizza prevalentemente nella membrana del reticolo endoplasmatico e nel Golgi nelle cellule a riposo, con accumulo nucleare e citoplasmatico della forma attiva clivata dopo stimolazione.
• Oltre alla UPR, CREB3 regola positivamente la chemiotassi leucocitaria indotta da LKN-1/CCL15 ed è coinvolto nella proliferazione, migrazione e differenziazione cellulare, suggerendo ruoli oncosoppressivi in determinati contesti. Riferimenti correlati: PMID:15001559, PMID:17296613, PMID:19779205
• Nella patogenesi microbica, CREB3 contribuisce all'espressione proteica di HIV-1, alla soppressione tumorale mediata dal core dell'HCV e alla latenza di HSV-1 sequestrando il fattore cellulare ospite HCFC1 nella membrana dell'ER nei neuroni sensoriali.
• CREB3 è espresso ubiquitariamente in tutti i tessuti, con livelli relativamente più alti nelle cellule dendritiche, e la sua attività trascrizionale è regolata con precisione dalle interazioni con gli HDAC e cofattori come CREBZF.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Questo anticorpo policlonale è stato prodotto contro un immunogeno che copre gli amminoacidi 1–230 di CREB3 umano; può rilevare sia la proteina full-length che i prodotti di clivaggio N-terminali.
• Per Western blotting (WB), il peso molecolare previsto è ~41 kDa, ma possono comparire bande aggiuntive corrispondenti alle forme processate; utilizzare lisati cellulari indotti da stress dell'ER come controllo positivo.
• Negli esperimenti di immunofluorescenza (IF/ICC), la permeabilizzazione e l'induzione dello stress dell'ER (ad esempio con tunicamicina o tapsigargina) possono migliorare la rilevazione del segnale nucleare.
• Per l'ELISA, validare l'anticorpo con l'immunogeno ricombinante o saggi cellulari, e considerare l'abbinamento con un anticorpo di rilevazione per lo sviluppo di ELISA sandwich.
• L'anticorpo presenta reattività incrociata con CREB3 di topo e ratto, permettendo studi traslazionali in modelli roditori; ottimizzare le diluizioni e le condizioni di blocco per ogni specie.
• Includere sempre controlli negativi appropriati (ad esempio campioni knockdown o knockout) per confermare la specificità.

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