Anticorpo policlonale di coniglio Anti-CRYAA per WB, IF-P, ELISA - P02489

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della catena A dell'alfa-cristallina

• La catena A dell'alfa-cristallina, nota anche come proteina da shock termico beta-4 (HspB4), è una principale proteina strutturale del cristallino oculare dei vertebrati e contribuisce alla sua trasparenza e all'indice di rifrazione.
  Riferimenti bibliografici: PMID:18302245
• Nella sua forma ossidata agisce come chaperonina molecolare, prevenendo l'aggregazione di proteine denaturate in diverse condizioni di stress, una funzione fondamentale per mantenere la trasparenza del cristallino.
  Riferimenti bibliografici: PMID:18199971, PMID:19595763, PMID:22120592
• CRYAA è necessaria per la corretta formazione dei filamenti intermedi del cristallino, come parte di un complesso con BFSP1 e BFSP2.
  Riferimenti bibliografici: PMID:28935373
• È un membro della famiglia delle piccole proteine da shock termico (sHSP) ed è espresso prevalentemente nel cristallino oculare a livello proteico.
• La localizzazione subcellulare include sia il citoplasma che il nucleo.
• Le modifiche post-traduzionali comprendono acetilazione, fosforilazione, ossidazione e formazione di legami disolfuro, che possono regolare la sua attività chaperonina.
• Le mutazioni nel gene CRYAA sono associate alla cataratta autosomica dominante, evidenziando la sua importanza per la fisiologia del cristallino.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla proteina CRYAA umana full-length (amminoacidi 1-173), e può consentire un riconoscimento ampio sia delle forme native che denaturate. Per Western blot, nei campioni positivi dovrebbe essere rilevata una banda specifica intorno a 20 kDa; si consiglia di utilizzare un controllo di proteina ricombinante per la verifica.
• La reattività incrociata è confermata con uomo, topo, ratto e zebrafish; pertanto l'anticorpo è adatto per studi cross-specie. Si raccomanda comunque la validazione nel vostro specifico sistema modello.
• Per l'immunofluorescenza (IF-P) è probabilmente richiesta la permeabilizzazione di cellule o sezioni di tessuto per rilevare la CRYAA citoplasmatica e nucleare. Si consiglia di ottimizzare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione.
• Nelle applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato per la cattura o la rilevazione dell'antigene. L'abbinamento con un anticorpo secondario o un sistema di rilevazione compatibili deve essere ottimizzato empiricamente.
• Poiché CRYAA può esistere sia in forma ridotta che ossidata in condizioni differenti, si raccomanda di valutare le condizioni di preparazione del campione (es. riducenti vs non riducenti) per analizzare specifici stati redox.

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