Anticorpo policlonale Anti-CRYZ per WB, ELISA - Q08257

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CRYZ

• CRYZ (zeta-crystallin) è una proteina multifunzionale che possiede sia attività di stabilizzazione dell'mRNA che attività enzimatica di ossidoreduttasi. Si lega ad elementi ricchi di AU (ARE) nella regione 3'-UTR degli mRNA target per migliorarne la stabilità, inclusi gli mRNA che codificano SLC12A1, enzimi coinvolti nel catabolismo della glutammina e la proteina antiapoptotica BCL2. Catalizza anche la riduzione delle ortochinoni in presenza di NADPH, suggerendo un ruolo nella disintossicazione da xenobiotici e nella protezione dallo stress ossidativo. Riferimenti correlati: PMID:17497241 PMID:20103721
• Durante l'acidosi metabolica, la CRYZ contribuisce ad aumenti adattativi nell'ammoniogenesi renale e nel riassorbimento transepiteliale di NH4+ stabilizzando gli mRNA degli enzimi del catabolismo della glutammina e del cotrasportatore SLC12A1 nel ramo ascendente spesso del midollare renale.
• La CRYZ è localizzata prevalentemente nel citoplasma/citosol, coerentemente con i suoi ruoli nella stabilizzazione dell'mRNA e nelle reazioni enzimatiche.
• Specificità tissutale: La CRYZ è espressa a livelli molto bassi nel cristallino, in contrasto con la sua espressione più elevata in altri tessuti dove svolge funzioni nella regolazione dell'mRNA e nell'equilibrio redox.
• Il gene CRYZ subisce splicing alternativo e la proteina è soggetta a modificazioni post-traduzionali inclusa l'acetilazione e la fosforilazione (come indicato nelle parole chiave UniProt), che potrebbero regolare la sua attività o le sue interazioni.
• Peso molecolare della proteina: L'isoforma canonica ha un peso molecolare calcolato di circa 35,2 kDa (UniProt: 35207 Da), sebbene il fornitore indichi 35kDa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno utilizzato era una proteina di fusione ricombinante corrispondente agli amminoacidi 1-329 di CRYZ umano (NP_001123514.1), che comprende la proteina a lunghezza intera. Questo design potrebbe consentire il rilevamento di più isoforme, ma deve essere eseguita la validazione per varianti di splicing specifiche.
• Questo anticorpo è raccomandato per applicazioni Western blot (WB) ed ELISA. Per il WB, considerare un intervallo di diluizione iniziale tipico per gli anticorpi policlonali (es. 1:500-1:2000) e validare nel proprio sistema campione. Il peso molecolare previsto è ~35kDa; è prevista una banda vicino a questa dimensione nei lisati di umano, topo e ratto, sebbene modificazioni post-traduzionali o splicing alternativo potrebbero alterare la migrazione.
• Dato che la CRYZ è coinvolta nella stabilità dell'mRNA e nella regolazione redox, la sua espressione può essere modulata da stress acidosico, condizioni ossidative o altri stimoli. Considerare l'uso di controlli positivi appropriati (es. linee cellulari renali in condizioni di acidosi) e l'inclusione di controlli di carico per il WB quantitativo.
• La cross-reattività è riportata per umano, topo e ratto, ma le variazioni specifiche della specie nella sequenza possono influenzare l'affinità. Verificare le prestazioni nel proprio organismo modello con un esperimento preliminare di titolazione.

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