Anticorpo policlonale coniglio Anti-CSRP3 - P50461

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di CSRP3

• CSRP3, noto anche come proteina LIM cardiaca (CLP) o proteina LIM muscolare (MLP), è un membro della famiglia delle proteine ricche di cisteina e glicina e contiene due domini di legame dello zinco LIM, che facilitano le interazioni proteina-proteina.
• Agisce come regolatore positivo della miogenesi fungendo da cofattore per i fattori di trascrizione miogenici bHLH (MYOD1, MYOG, MYF6), ne aumenta il legame al DNA e promuove l'espressione genica specifica del muscolo.
• Nei cardiomiociti svolge un ruolo strutturale cruciale organizzando le componenti citosoliche alla linea Z, agendo come impalcatura che ancora la calcineurina e permette la rilevazione della stiramento meccanico e la segnalazione calcineurina-NFAT attivata dallo stress.
• Si lega direttamente ai filamenti di actina, li reticola in fasci e li protegge dalla depolimerizzazione mediata da cofilina. Inoltre modula bidirezionalmente l'attività di CFL2, aumentando o riducendo la depolimerizzazione dell'actina a seconda del rapporto CSRP3:CFL2.
  Riferimenti correlati:
  PMID:19752190
  PMID:24934443
• In vitro inibisce l'attività della proteina chinasi C alfa (PKC/PRKCA), suggerendo un ruolo nell'attenuazione della segnalazione di stress cardiaco eccessivo.
  Riferimenti correlati:
  PMID:27353086
• Una isoforma alternativa (isoforma 2) è rilevata nel muscolo striato, dove può regolare l'organizzazione precoce dei sarcomeri e influenzare negativamente la differenziazione delle miotubi.
• Subcellulare si localizza nel nucleo, nel citoplasma e nelle linee Z sarcomeriche, coerente con il doppio ruolo nella regolazione trascrizionale e nell'organizzazione del citoscheletro.
• La fosforilazione e la coordinazione degli ioni metallici sono modificazioni post-traduzionali previste che probabilmente modulano la sua attività e le sue interazioni.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno comprende quasi la totalità della CSRP3 umana (aa 1-194), quindi ci si aspetta che l'anticorpo policlonale riconosca più epitopi e possa rilevare entrambe le isoforme.
• Per il Western blotting, una banda predominante intorno ai 21 kDa dovrebbe comparire nei lisati di muscolo cardiaco e scheletrico di uomo, topo o ratto; includere controlli positivi e negativi appropriati.
• Nell'immunistochimica (IHC-P), testare le tecniche standard di recupero dell'antigene (ad es., tampone citrato pH 6.0) e ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario; a causa della localizzazione nucleare/citoplasmatica, ci si aspetta una colorazione nei cardiomiociti e nelle miofibre a contrazione lenta.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, considerare la co-colorazione con marcatori sarcomerici (ad es., α-actinin) per verificare la localizzazione alla linea Z; il metodo di permeabilizzazione può influenzare la rilevazione.
• Le applicazioni ELISA possono beneficiare di un passaggio di blocco adattato alla matrice del campione; possono essere esplorati formati con antigene rivestito o sandwich.
• Come per ogni anticorpo policlonale, si raccomanda la validazione lotto per lotto e la reattività crociata tra specie deve essere confermata nel sistema sperimentale specifico.

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