Anticorpo policlonale anti-CTSC per WB, IF/ICC, ELISA - P53634

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: funzione e localizzazione della CTSC

• La dipeptidil peptidasi 1 (DPP1), nota anche come catepsina C, è una tiolo proteasi con attività dipeptidilpeptidasica. Agisce su substrati dipeptidici con vincoli di specificità: la prolina non può occupare la posizione P1 e l'arginina non può occupare la posizione P2. Riferimenti correlati: PMID:1586157
• Può funzionare sia come esopeptidasi che come endopeptidasi ed è fondamentale per l'attivazione di serina proteasi come l'elastasi, la catepsina G e le granzimi A e B, essenziali per le funzioni delle cellule immunitarie. Riferimenti correlati: PMID:8428921
• Nomi alternativi includono catepsina J, DPP-I (DPPI) e dipeptidil transferasi, che riflettono la sua classificazione enzimatica e storica.
• Codificata dal gene CTSC, che dà origine a varianti di splicing alternativo, la proteina viene elaborata proteoliticamente per produrre catene pesanti e leggere che formano un tetramero.
• A livello subcellulare, la CTSC è localizzata nei lisosomi, dove partecipa alla degradazione proteica e all'attivazione dei proenzimi.
• È espressa ubiquitariamente, con livelli elevati in polmone, rene e placenta, e livelli intermedi in colon, intestino tenue, milza e pancreas, sottolineando il suo ruolo di mantenimento cellulare.
• Le modifiche post-traduzionali includono la glicosilazione e la formazione di ponti disolfuro; l'enzima viene sintetizzato come zimogeno che richiede attivazione.
• Clinicamente, le mutazioni nella CTSC sono associate alla cheratodermia palmoplantare (es. sindrome di Papillon-Lefèvre), evidenziando la sua importanza nella funzione di barriera cutanea.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre i residui 25–134, una regione probabilmente parte del propeptide o della catena matura. Questo potrebbe rilevare sia forme precursori che elaborate, che potrebbero apparire come bande multiple in WB corrispondenti ai pesi previsti di 15 kDa, 16 kDa e 52 kDa.
• Per il Western blotting, considerare l'utilizzo di condizioni riducenti e la validazione delle bande osservate rispetto ai prodotti di scissione noti della CTSC.
• In IF/ICC, le condizioni di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzate per accedere ai compartimenti lisosomiali; si raccomanda la co-colorazione con marcatori lisosomiali.
• Per l'ELISA, questo anticorpo policlonale può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; titolare per un rapporto segnale-rumore ottimale nella matrice del campione.
• È indicata la reattività crociata con il topo; validare le prestazioni in tessuti o linee cellulari murine se destinato a tali modelli.
• Essendo un policlonale, la coerenza tra lotti dovrebbe essere valutata; considerare l'uso di antigene ricombinante per il blocco nei saggi immunologici.

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