Anticorpo policlonale anti-CUL4B per WB, ELISA - Q13620

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione di CUL4B

• CUL4B svolge la funzione di proteina scaffold all'interno dei complessi di ubiquitina ligasi E3 cullina-RING, coordinando il posizionamento dei substrati e il trasferimento dell'ubiquitina alle proteine bersaglio per la degradazione proteasomica. Riferimenti correlati: PMID:14578910, PMID:16678110, PMID:18593899
• In risposta al danno al DNA, i complessi contenenti CUL4B mediano la poliubiquitinazione di CDT1 e degli istoni H2A, H3 e H4, e vengono indirizzati alla cromatina danneggiata dai raggi UV tramite DDB2, implicando CUL4B nella riparazione e nella replicazione del DNA. Riferimenti correlati: PMID:14578910, PMID:16678110, PMID:18593899
• Il sottocomplesso DCX(AMBRA1), contenente CUL4B, agisce come regolatore principale della transizione G1/S ubiquitinando le cicline D1, D2 e D3 fosforilate, e modula inoltre le ligasi Cul5-RING attraverso la degradazione di Elongin-C. Riferimenti correlati: PMID:33854232, PMID:33854239, PMID:30166453
• CUL4B è necessaria per l'ubiquitinazione della ciclina E (CCNE1/CCNE2) e garantisce la normale progressione della fase G1, evidenziando il suo ruolo critico nel controllo del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:16322693, PMID:19801544
• Regola la via di segnalazione mTORC1 in modo dipendente dal proteasoma attraverso l'interazione con MLST8, influenzando la crescita, le dimensioni e il metabolismo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:18235224
• Insieme a CUL4A, CUL4B contribuisce alla biogenesi dei ribosomi, sottolineando il suo ruolo più ampio nei processi anabolici cellulari. Riferimenti correlati: PMID:26711351
• CUL4B è localizzata sia nel citoplasma sia nel nucleo e subisce modifiche post-traduzionali, tra cui acetilazione e fosforilazione.
• Le mutazioni di CUL4B sono associate a disabilità intellettiva legata al cromosoma X, bassa statura e altre anomalie dello sviluppo.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde ai primi 1-152 amminoacidi N-terminali di CUL4B umano; questa regione può essere conservata tra le specie, in accordo con la reattività crociata osservata tra uomo e topo.
• Per il Western blot, utilizzare condizioni standard riducenti e un controllo di caricamento (ad es., GAPDH) per convalidare la specificità; la banda attesa è di circa 104 kDa.
• Ottimizzare la diluizione dell'anticorpo primario e le condizioni di incubazione (ad es., 1:500–1:2000 per WB) utilizzando lisati cellulari positivi, come HeLa o HEK293, e includere sempre un controllo negativo (ad es., lisati sottoposti a knockdown, se disponibili).
• Nell'ELISA, considerare il rivestimento con l'immunogeno ricombinante o con la proteina purificata e titolare le concentrazioni degli anticorpi di cattura e di rilevazione per ottenere rapporti segnale/rumore ottimali.

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