Anticorpo policlonale di coniglio contro Cullin 2 per WB, IF/ICC, ELISA - Q13617

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di Cullin 2

• Cullin-2 (CUL2) è un componente centrale dei complessi E3 ubiquitina-protein ligasi ElonginB/C-CUL2/5-SOCS-box protein (ECS), che mediano l'ubiquitinazione e la successiva degradazione proteasomale delle proteine bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:11384984 PMID:26138980 PMID:29775578
• All'interno del complesso ECS, CUL2 funge da impalcatura rigida che posiziona sia il substrato sia l'enzima E2 coniugante l'ubiquitina, contribuendo all'efficienza catalitica. Riferimenti correlati: PMID:10973499 PMID:11384984 PMID:12609982
• L'attività E3 ubiquitina ligasi del complesso richiede la neddilazione di CUL2 ed è inibita quando CUL2 deneddilato si lega a TIP120A/CAND1. Riferimenti correlati: PMID:12609982 PMID:24076655 PMID:27565346
• I complessi ECS che contengono la subunità di riconoscimento del substrato von Hippel-Lindau (VHL) ubiquitinano specificamente il fattore indotto dall'ipossia (HIF), regolando quindi le risposte cellulari ai livelli di ossigeno. Riferimenti correlati: PMID:10973499 PMID:9122164
• Diversi complessi ECS partecipano alla via DesCEND, che riconosce i degroni C-terminali (C-degroni) sulle proteine bersaglio, portando alla loro ubiquitinazione e degradazione. Riferimenti correlati: PMID:26138980 PMID:29775578 PMID:29779948
• I complessi ECS basati su CUL2 cooperano con la E3 ligasi ARIH1 in un meccanismo in tandem per mediare l'ubiquitinazione delle proteine bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:27565346
• Cullin-2 è localizzato prevalentemente nel nucleo, in linea con il suo ruolo nel turnover delle proteine nucleari.
• La proteina subisce diverse modifiche post-traduzionali tra cui acetilazione e fosforilazione, ed è soggetta a neddilazione e altre coniugazioni simili all'ubiquitina.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno di questo anticorpo corrisponde agli amminoacidi 40 – 310 di Cullin 2 umano (NP_001185708.1), una regione che può essere conservata tra le isoforme. Questo progetto permette di rilevare più varianti di CUL2.
• Per Western blot (WB), si consiglia di utilizzare condizioni riducenti e di caricare controlli positivi appropriati come estratti nucleari da linee cellulari umane (ad esempio HeLa o HEK293). È attesa una banda di circa 87 kDa.
• Per immunofluorescenza/immunocitochimica (IF/ICC), validare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione; la localizzazione nucleare deve essere confermata in campioni umani.
• Nelle applicazioni ELISA, abbinare questo anticorpo a un sistema di rilevamento compatibile; potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione del test a seconda della conformazione della proteina bersaglio.

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