Anticorpo policlonale di coniglio anti-Cullin 3 per WB, IF/ICC, ELISA - Q13618

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Cullin-3

• La Cullin-3 (CUL-3) è una proteina di impalcatura appartenente alla famiglia delle culline e costituisce il componente centrale di molteplici complessi ligasi E3 della ubiquitina basati su cullina-RING, BCR (BTB-CUL3-RBX1). Insieme ad ARIH1, questi complessi mediano l'ubiquitinazione e la successiva degradazione proteasomica delle proteine bersaglio. Riferimenti correlati: PMID:29695787 PMID:27565346
• L'attività della ligasi dipende dalla neddilazione della subunità cullina ed è inibita dall'associazione della subunità deneddilata con CAND1/TIP120A.
• La specificità per il substrato è determinata dalla proteina adattatrice contenente il dominio BTB. Ad esempio, il complesso BCR(KEAP1) agisce come sensore chiave dello stress ossidativo ubiquitinando NFE2L2/NRF2. Riferimenti correlati: PMID:15601839 PMID:16006525
• Altri complessi BCR regolano processi diversi, quali l'esportazione del collagene (BCR(KLHL12) tramite la monoubiquitinazione di SEC31), il trasporto ionico nel rene (BCR(KLHL3) con WNK4 come bersaglio) e la localizzazione del complesso passeggero cromosomico durante la mitosi (BCR(KLHL21) con AURKB come bersaglio). Riferimenti correlati: PMID:22358839 PMID:23387299 PMID:19995937
• La localizzazione subcellulare comprende nucleo, citoplasma, apparato di Golgi, centrosoma, fuso e ciglia/flagelli, in linea con i suoi ampi ruoli funzionali.
• È ampiamente espressa, con livelli relativamente più elevati rilevati nel cervello, negli spermatozoi e nei testicoli. Le principali modificazioni post-traduzionali includono neddilazione, acetilazione e fosforilazione. Le varianti di sequenza sono associate a disturbi neurologici quali il disturbo dello spettro autistico e l'epilessia.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Essendo un anticorpo policlonale generato contro un frammento ricombinante (aa 569-768), riconosce molteplici epitopi ed è adatto sia a condizioni denaturanti (WB) sia a condizioni native (IF/ICC).
• Per il WB: si prevede una banda intorno a 89 kDa; si consiglia di eseguire una serie di diluizioni per ottimizzare il rapporto segnale/rumore nel sistema campione pertinente.
• Per IF/ICC: validare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione; l'anticorpo può rilevare la Cullin-3 in vari compartimenti subcellulari (nucleo, citoplasma e centrosomi).
• Per ELISA: l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevazione; l'abbinamento con un anticorpo monoclonale compatibile può migliorare la specificità del test.
• A causa della reattività crociata con topo e ratto, confermare i livelli di espressione endogena nella specifica linea cellulare o nel tessuto prima di effettuare studi quantitativi.

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