Anticorpo monoclonale rabbit anti-CXCR5 per WB, IF-P, ELISA - P32302

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione di CXCR5

• Il recettore 5 per chemochine di tipo C-X-C (CXCR5), noto anche come recettore 1 del linfoma di Burkitt (BLR1) e recettore 15 derivato da monociti (MDR-15), è un recettore accoppiato a proteina G (GPCR) codificato dal gene CXCR5 (ID gene: 643) nell'uomo.
• CXCR5 funziona come recettore specifico per il chemiotattin dei linfociti B (BLC/CXCL13) e media l'homing e la migrazione dei linfociti B nei follicoli B della milza e delle placche di Peyer, ma non nei linfonodi mesenterici o periferici.
• Può svolgere un ruolo regolatorio nella linfomagenesi del linfoma di Burkitt e/o nella differenziazione dei linfociti B, in linea con la sua espressione nei linfociti B maturi e nelle cellule del linfoma di Burkitt.
• Come GPCR tipico, CXCR5 è una proteina di membrana multipasso localizzata sulla membrana cellulare, caratterizzata da eliche transmembrana, legami disolfuro e glicosilazione N-linked.
• Il recettore è coinvolto nell'attivazione dei linfociti B e nella trasduzione del segnale chemiotattico, collegando il legame della chemochina alle vie intracellulari mediate da proteine G.
• L'splicing alternativo del trascritto di CXCR5 può generare isoforme con proprietà funzionali distinte, anche se le varianti specifiche non sono descritte in questa scheda.
• Le parole chiave associate a CXCR5 includono attivazione dei linfociti B, recettore accoppiato a proteina G, glicoproteina, legame disolfuro e transmembrana, che riflettono il suo ruolo di recettore di superficie cellulare coinvolto nell'immunità adattativa.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide sintetico che comprende gli amminoacidi 273-372 di CXCR5 umano, una regione probabilmente esposta sul lato citoplasmatico o in un anello extracellulare; gli utenti devono tenere conto di questo quando interpretano il segnale nelle forme full-length rispetto a quelle troncate.
• Per Western blot (WB), CXCR5 ha un peso molecolare previsto di 42 kDa; assicurarsi che la percentuale di gel e le condizioni di trasferimento siano ottimizzate per le proteine di membrana multipasso, che possono richiedere tempi di trasferimento più lunghi o tamponi speciali.
• La rilevazione nei protocolli di immunofluorescenza (IF) può trarre vantaggio da una permeabilizzazione delicata per consentire all'anticorpo di accedere alla regione dell'epitopo intracellulare; validare la colorazione in tipi cellulari noti per essere positivi a CXCR5 come i linfociti B maturi.
• Le applicazioni ELISA devono includere controlli appropriati, poiché l'anticorpo può riconoscere epitopi denaturati o lineari presentati dal peptide sintetico, cosa che potrebbe influenzare il legame al recettore nativo ripiegato.
• È riportata la reattività crociata con CXCR5 di topo e ratto; tuttavia, verificare sempre la reattività e la specificità nella specie e nel tessuto di vostro interesse, in particolare per applicazioni diverse da quelle elencate.
• Le proteine di membrana come CXCR5 possono essere sensibili alla preparazione del campione; evitare temperature elevate e usare gli agenti riducenti con cautela per prevenire l'aggregazione.

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