Anticorpo Policlonale Anti-CYB5R3 per WB, IF/ICC, ELISA - P00387

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CYB5R3

• La NADH-citocromo b5 reduttasi 3 (CYB5R3), nota anche come diaforasi-1, è un enzima flavoproteico (contenente FAD) codificato dal gene CYB5R3 (DIA1) nell'uomo.
• CYB5R3 catalizza la riduzione di due molecole di citocromo b5 utilizzando NADH come donatore di elettroni, svolgendo un ruolo cruciale nel trasporto di elettroni e nelle reazioni redox.
• L'enzima è coinvolto nel metabolismo lipidico, inclusa la biosintesi del colesterolo e la desaturazione degli acidi grassi, attraverso la sua interazione con il citocromo b5.
• CYB5R3 si localizza sulla membrana del reticolo endoplasmatico, sulla membrana mitocondriale esterna e nel citoplasma, riflettendo i suoi ruoli multifunzionali.
• È espresso negli stadi finali della maturazione eritroide, suggerendo un'importante funzione nel metabolismo dei globuli rossi.
• Le modificazioni post-traduzionali includono acetilazione, miristoilazione e fosforilazione, che possono regolare la sua associazione di membrana e l'attività.
• Le mutazioni in CYB5R3 sono associate a metaemoglobinemia congenita, evidenziandone il significato clinico.
• La proteina ha un peso molecolare calcolato di circa 34 kDa (34235 Da), coerente con la banda osservata nel western blot.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno comprende gli amminoacidi 125–334 di CYB5R3 umano (NP_001165131.1), una regione conservata tra le isoforme tipiche; verificare la reattività incrociata in sistemi diversi da umano, topo o ratto se necessario.
• Nel western blot, aspettarsi una banda principale intorno a 34 kDa; lo splicing alternativo o le PTM possono produrre bande aggiuntive, quindi validare nel lisato cellulare o tissutale rilevante.
• Per l'immunofluorescenza/ICC, l'anticorpo può rilevare CYB5R3 nel RE e nei mitocondri, producendo un pattern citoplasmatico reticolare e punteggiato; includere marcatori di organelli per studi di co-localizzazione.
• Per l'ELISA, titolare l'anticorpo e utilizzare controlli positivi appropriati; per saggi sandwich si consiglia l'abbinamento con un anticorpo di rilevamento accoppiato.
• Conservare l'anticorpo alla temperatura raccomandata (es. -20°C) al ricevimento e minimizzare i cicli di congelamento-scongelamento per preservarne l'attività.

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