Anticorpo policlonale coniglio anti-CYC1 per WB, IHC-P, ELISA - P08574

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CYC1

• CYC1 codifica il citocromo c1, una proteina emica che fa parte del complesso III della catena respiratoria mitocondriale (ubichinolo-citocromo c ossidoreduttasi). È noto anche come subunità 4 del complesso III, UQCR4 e MC3DN6.
• Il citocromo c1 è una subunità catalitica principale che contiene un gruppo emico di tipo c che trasferisce elettroni dalla proteina ferro-zolfo Rieske al citocromo c.
• Il complesso citocromo b-c1 catalizza il trasferimento di elettroni dall'ubichinolo al citocromo c, accoppiando questa reazione redox al traslocazione di protoni attraverso la membrana interna mitocondriale tramite il ciclo Q.
• Localizzato nella membrana interna mitocondriale, CYC1 è una proteina transmembrana a passaggio singolo con un peptide di transito per l'importazione mitocondriale.
• Il citocromo c1 è soggetto a fosforilazione, che può regolare la sua attività o il suo assemblaggio.
• Le mutazioni in CYC1 sono associate alla malattia mitocondriale primaria, specificamente alla deficienza del complesso III mitocondriale, tipo nucleare 6 (MC3DN6).
• La proteina matura ha un peso molecolare di circa 35 kDa (35422 Da da UniProt, coerente con i 35 kDa osservati su SDS-PAGE).

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'anticorpo è prodotto contro una proteina ricombinante che copre gli amminoacidi 85-291 di CYC1 umano (NP_001907.2). Questo immunogeno copre il peptide maturo dopo la rimozione della sequenza di targeting mitocondriale e include i domini di legame dell'eme e transmembrana.
• Per il Western blot, è prevista una banda predominante a circa 35 kDa negli estratti mitocondriali umani, di topo e di ratto. Validare i controlli di carico e considerare l'uso di inibitori delle proteasi per prevenire la degradazione.
• Nell'immunoistochimica (IHC-P), potrebbe essere necessaria il recupero dell'antigene; testare sia i metodi indotti dal calore che quelli enzimatici. Per l'ELISA, si può considerare il rivestimento diretto con l'immunogeno ricombinante o il complesso III purificato come controllo positivo.

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