Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Ciclina D2 per WB e ELISA - P30279

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Ciclina D2

• La Ciclina D2 è una ciclina specifica della fase G1/S che si assembla con CDK4 per formare un complesso chinasi attivo essenziale per la progressione del ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:18827403, PMID:8114739
• Il complesso ciclina D2-CDK4 fosforila la proteina del retinoblastoma (RB1) e i membri correlati della famiglia, determinando il rilascio dei fattori di trascrizione E2F e la trascrizione dei geni necessari per la transizione della fase G1. Riferimenti correlati: PMID:18827403, PMID:8114739
• Questo complesso funge da integratore centrale dei segnali mitogeni e antimitogeni, collegando gli stimoli extracellulari all'ingresso nel ciclo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:18827403, PMID:8114739
• La Ciclina D2 si localizza principalmente nel nucleo, ma è presente anche nel citoplasma e sulla membrana nucleare, riflettendo una regolazione dinamica.
• L'impianto alternativo dell'RNA messaggero genera multiple isoforme e la proteina è soggetta a modifiche post-traduzionali, tra cui la fosforilazione e la coniugazione con proteine simili all'ubiquitina.
• Le mutazioni nel gene CCND2 sono associate a fenotipi patologici (parola chiave: Variante patologica).

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno comprende l'intera regione N-terminale (aa 1‑289), che è conservata tra uomo, topo e ratto, e questo spiega la segnalata reattività crociata tra più specie.
• Per il Western blot, si consiglia di utilizzare lisati di cellule intere da linee cellulari in proliferazione (ad esempio HeLa, 293T) in cui la Ciclina D2 è espressa; potrebbe essere necessaria l'ottimizzazione delle condizioni di lisì per preservare lo stato di fosforilazione.
• Per l'ELISA, validare l'anticorpo contro la proteina ricombinante di Ciclina D2 e prendere in considerazione l'utilizzo di una coppia di anticorpi abbinata in formato sandwich se è richiesta la rilevazione quantitativa.
• Includere sempre controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio lisati di cellule note come positive per Ciclina D2 e cellule knockout) e titolare l'anticorpo primario per determinare la concentrazione di lavoro ottimale per il vostro sistema di saggio specifico.

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