Anticorpo Policlonale Anti-CYP27A1 per WB, ELISA - Q02318

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione di CYP27A1

• Il Citocromo P450 27A1 (CYP27A1), noto anche come sterolo 26-idrossilasi o vitamina D3 25-idrossilasi, è una monoossigenasi mitocondriale essenziale per il metabolismo del colesterolo e la sintesi degli acidi biliari.
• Catalizza l'idrossilazione regio- e stereospecifica del colesterolo e dei suoi derivati, convertendo il gruppo metilico terminale in un carbossilato tramite una reazione in tre passaggi; questa fase è fondamentale sia per la via classica sia per quella alternativa degli acidi biliari. Riferimenti correlati:
  • PMID:11412116
  • PMID:1708392
  • PMID:2019602
• Genera ligandi ossisterolici attivi, come il 27-idrossicolesterolo, che agiscono sui recettori nucleari NR1H2 e NR1H3 per regolare la trascrizione genica del metabolismo lipidico. Riferimenti correlati:
  • PMID:12077124
  • PMID:9660774
• Idrossila il 7-chetocolesterolo per formare il 7-cheto,27-idrossicolesterolo, che può attivare la via di segnalazione smoothened (SMO) (per similarità).
• Media l'idrossilazione del colestanolo nel cervelletto, facilitando la diffusione degli steroli attraverso la barriera emato-encefalica e la clearance sistemica. Riferimenti correlati:
  • PMID:28190002
• Contribuisce all'attivazione della vitamina D3 tramite 25-idrossilazione, una fase redox necessaria per la piena attività ormonale. Riferimenti correlati:
  • PMID:15465040
• È localizzato sulla membrana interna mitocondriale, coerente con il suo ruolo nel processo di lavorazione degli steroli.
• A livello proteico è espresso nella retina neurale, nell'epitelio pigmentato retinico e nella materia grigia/bianca del cervelletto. Riferimenti correlati:
  • PMID:21411718
  • PMID:28190002
• Mutazioni nel gene CYP27A1 causano la xantomatoasi cerebrotendinea (CTX), una rara malattia da accumulo lipidico che altera la sintesi degli acidi biliari.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno (amminoacidi 200–400) copre una porzione del dominio catalitico; assicurarsi che l'epitopo riconosciuto dall'anticorpo sia accessibile nelle vostre condizioni sperimentali.
• Per Western blot è attesa una banda di circa 60 kDa; come controllo positivo si consiglia di utilizzare lisati arricchiti di mitocondri o estratti di cellule intere da fegato o retina.
• Convalidare la specificità dell'anticorpo confrontando il segnale in cellule che sovraesprimono CYP27A1 rispetto a modelli di knockdown/knockout.
• Per ELISA, titolare l'anticorpo utilizzando CYP27A1 ricombinante o peptide antigenico per determinare la diluizione di lavoro ottimale.
• La reattività crociata con topo e ratto permette studi traslazionali; in ogni caso, verificare la reattività crociata nel vostro tessuto o linee cellulare specifici.

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