Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CYP27A1 per WB ed ELISA - Q02318

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CYP27A1 (Sterolo 26-idrossilasi)

• CYP27A1 codifica per un enzima mitocondriale del citocromo P450, la sterolo 26‑idrossilasi, appartenente alla famiglia CYP27.
• Catalizza l'idrossilazione in tre fasi del colesterolo al gruppo metilico terminale, producendo 27‑idrossicolesterolo, un ossisterolo critico.
  Riferimenti correlati: PMID:12077124, PMID:21411718, PMID:28190002
• Attraverso questa attività, CYP27A1 regola l'omeostasi del colesterolo avviando la sintesi degli acidi biliari tramite sia la via classica che quella alternativa.
  Riferimenti correlati: PMID:11412116, PMID:1708392, PMID:2019602
• Gli ossisteroli risultanti agiscono come ligandi per i recettori X del fegato (LXR), modulando la trascrizione di geni coinvolti nel metabolismo lipidico.
  Riferimenti correlati: PMID:12077124, PMID:9660774
• CYP27A1 è coinvolto anche nel metabolismo del 7‑chetocolesterolo nella retina, potenzialmente proteggendo dai danni infiammatori, e nel metabolismo del colestanolo nel cervelletto, favorendo la clearance degli steroli attraverso la barriera emato-encefalica.
  Riferimenti correlati: PMID:21411718, PMID:28190002
• Inoltre, CYP27A1 può contribuire all'attivazione della vitamina D catalizzando l'idrossilazione in posizione 25 della vitamina D3.
  Riferimenti correlati: PMID:15465040
• La proteina risiede nella membrana mitocondriale interna ed è rilevata nella retina neurale, nell'epitelio pigmentato retinico e nella sostanza grigia e bianca cerebellare.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un peptide C‑terminale (aa 431‑530); confermare la reattività dell'anticorpo contro CYP27A1 sia nativo che denaturato tramite saggi WB ed ELISA paralleli.
• Per il Western blot, ci si aspetta una banda a ~60 kDa; l'uso di lisati arricchiti in mitocondri da tessuto epatico o retinico può migliorare la sensibilità di rilevamento.
• In ELISA, considerare l'uso di un peptide sintetico o di CYP27A1 ricombinante a lunghezza completa come antigene di cattura per valutare la specificità e l'affinità di legame.
• La reattività crociata con CYP27A1 di topo e ratto rende questo anticorpo adatto per studi traslazionali, ma è necessario validare la reattività nelle relative matrici campione specifiche per specie.
• Poiché CYP27A1 è una proteina di membrana a bassa abbondanza, considerare strategie di immunoprecipitazione o di amplificazione del segnale per campioni a bassa espressione.

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