Anticorpo monoclonale di coniglio anti-CYP2D6 per WB, IF-P, ELISA - P10635

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della CYP2D6

• Il citocromo P450 2D6 (CYP2D6), noto anche come 4-idrossilasi della debrisochina, è un enzima monoossigenasi appartenente alla superfamiglia dei citocromi P450. È codificato dal gene CYP2D6, soggetto a splicing alternativo che genera molteplici isoforme.
• La CYP2D6 catalizza il metabolismo ossidativo di diversi substrati endogeni ed esogeni, tra cui acidi grassi, steroidi, retinoidi e numerosi farmaci terapeutici (ad es. antiaritmici, antagonisti dei recettori adrenergici, antidepressivi triciclici). Riferimenti correlati: PMID:18698000 PMID:19965576 PMID:20972997
• L'enzima è localizzato principalmente nella membrana del reticolo endoplasmatico e nelle frazioni microsomiali delle cellule epatiche, in linea con il suo ruolo centrale nel metabolismo di fase I.
• La CYP2D6 contiene un cofattore eme-ferro essenziale per la sua attività catalitica ed è classificata come ossidoreduttasi che lega i metalli.
• Metabolizza specificamente gli endocannabinoidi, come l'anandamide, producendo derivati epossidici e idrossilati che possono modulare le vie di segnalazione. Riferimenti correlati: PMID:18698000 PMID:21289075
• La CYP2D6 converte inoltre il colesterolo in 25-idrossicolesterolo, un regolatore fisiologico dell'omeostasi del colesterolo cellulare. Riferimenti correlati: PMID:21576599
• Inoltre, catalizza la trasformazione ossidativa del retinolo all-trans in retinaldeide all-trans, un precursore per la biosintesi dell'acido retinoico. Riferimenti correlati: PMID:10681376

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• Per il Western blot (WB), si prevede una banda di circa 56 kDa. Utilizzare lisati di controllo positivo appropriati ottenuti da tessuto epatico umano, murino o di ratto, oppure da cellule che esprimono CYP2D6, per confermare la specificità.
• Negli esperimenti di immunofluorescenza su paraffina (IF-P), ottimizzare le fasi di recupero antigenico e permeabilizzazione per garantire un'adeguata esposizione del bersaglio localizzato nella membrana del reticolo endoplasmatico. Per la colocalizzazione si raccomanda la controcolorazione con un marcatore del reticolo endoplasmatico.
• Per le applicazioni ELISA, considerare l'utilizzo del frammento immunogeno ricombinante della CYP2D6 come standard quantitativo per generare curve di calibrazione affidabili.
• A causa dei polimorfismi genetici della CYP2D6, i livelli di espressione possono variare tra gli individui; si consiglia di validare l'anticorpo nella matrice del campione prevista e di considerare le informazioni genotipiche nell'interpretazione dei risultati.
• L'origine monoclonale di coniglio garantisce elevata affinità e riproducibilità tra i lotti, ma le diluizioni ottimali devono essere determinate empiricamente per ciascun saggio e tipo di campione.

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