Anticorpo monoclonale di coniglio Anti-CYP39A1 per WB, IHC-P, ELISA - Q9NYL5

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CYP39A1

• Il gene CYP39A1 codifica una monoossigenasi del citocromo P450 nota come 24-idrossicolesterolo 7-alfa-idrossilasi, chiamata anche ossisterolo 7-alfa-idrossilasi.
• Catalizza la 7-alfa idrossilazione del (24S)-idrossicolesterolo, un passaggio chiave nella conversione degli ossisteroli neuronali in acidi biliari nel fegato, contribuendo quindi alla clearance del colesterolo neuronale. Riferimenti correlati: PMID:10748047 PMID:25201972
• L'enzima utilizza ossigeno molecolare e NADPH tramite la citocromo P450 reduttasi per inserire un atomo di ossigeno nel substrato e ridurre il secondo ad acqua. Riferimenti correlati: PMID:10748047 PMID:25201972
• CYP39A1 è un membro della superfamiglia dei citocromi P450 e presenta un sito attivo a eme-ferro, caratteristico delle sue funzioni di monoossigenasi e ossidoriduttasi.
• Subcellularmente, si localizza sulla membrana del reticolo endoplasmatico e sulla membrana dei microsomi.
• L'espressione tissutale è specifica per il fegato, in linea con il suo ruolo nella sintesi epatica degli acidi biliari.
• La proteina contiene un'elica transmembrana e una sequenza segnale, con un peso molecolare previsto di circa 54 kDa (UniProt: 54116 Da).

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• Per il Western blotting, si consiglia un intervallo di diluizione iniziale compreso tra 1:500 e 1:2000, e la validazione con controlli positivi e negativi appropriati (ad esempio, lisati di fegato).
• Nell'IHC-P, il recupero dell'antigene tramite recupero epitopico indotto dal calore (HIER) a pH 6 o 9 può migliorare la rilevazione; titrare l'anticorpo per ottimizzare l'intensità della colorazione.
• Le prestazioni ELISA possono essere ottimizzate con formati diretti o sandwich, abbinati a proteine ricombinanti o antigeni peptidici adeguati.
• Poiché l'immunogeno è un peptide compreso tra gli amminoacidi 301–400, l'anticorpo può presentare reattività crociata con il CYP39A1 di topo per omologia di sequenza; confermare la reattività nel proprio sistema sperimentale.
• Dato che l'espressione è specifica per il fegato, si consigliano lisati o sezioni di tessuto epatico come controlli positivi; utilizzare modelli knockout o siRNA per verificare la specificità.

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