Anticorpo policlonale anti-CYP3A4 per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P08684

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di CYP3A4

• Il Citocromo P450 3A4 (CYP3A4) è una monoossigenasi eme-tiolato appartenente alla superfamiglia del citocromo P450, svolgendo un ruolo fondamentale nel metabolismo ossidativo di una vasta gamma di composti endogeni e xenobiotici.
• Principale enzima metabolizzatore dei farmaci: Catalizza la solfoxidazione dell'albendazolo e del fenbendazolo, e l'idrossilazione della chinina, rendendolo un determinante chiave dell'efficacia e tossicità dei farmaci (PubMed:10759686, PubMed:8968357). Riferimenti correlati: PMID:10759686, PMID:8968357
• Metabolismo degli ormoni steroidei: Converte il testosterone in 2beta- e 6beta-idrossitestosteroni meno attivi e forma idrossiestrogeni dall'estrone e dal 17beta-estradiolo, regolando l'attività ormonale (PubMed:15373842, PubMed:15764715, PubMed:2732228, PubMed:11555828, PubMed:12865317, PubMed:14559847). Riferimenti correlati: PMID:15373842, PMID:15764715, PMID:2732228, PMID:11555828, PMID:12865317, PMID:14559847
• Degradazione del colesterolo e biosintesi degli acidi biliari: Contribuisce alla formazione di 4beta- e 25-idrossicolesteroli, coinvolta nell'omeostasi del colesterolo (PubMed:21576599). Riferimenti correlati: PMID:21576599
• Metabolismo dei retinoidi: Ossida l'all-trans-retinolo in all-trans-retinale e metabolizza ulteriormente l'acido retinoico, influenzando le vie di segnalazione (PubMed:10681376, PubMed: 11093772). Riferimenti correlati: PMID:10681376, PMID:11093772
• Metabolismo dei lipidi e endocannabinoidi: Catalizza l'idrossilazione bisalilica e l'epossidazione degli acidi grassi polinsaturi, e ossida l'anandamide, modulando potenzialmente la segnalazione lipidica (PubMed:9435160, PubMed:19965576, PubMed:20702771). Riferimenti correlati: PMID:9435160, PMID:19965576, PMID:20702771
• Localizzazione subcellulare: CYP3A4 è ancorato alla membrana del reticolo endoplasmatico, dove svolge le sue funzioni nel metabolismo dei farmaci e dei lipidi.
• Espressione tissutale: Altamente espresso nel fegato e nell'epitelio intestinale, con livelli inferiori nella prostata, nel rene e in altri tessuti, coerente con i suoi ruoli nella clearance sistemica e nel metabolismo extraepatico.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli aminoacidi 244-503 del CYP3A4 umano, una regione che può includere epitopi conservati tra i mammiferi; la reattività crociata con topo e ratto è riportata, ma si consiglia la verifica nel sistema modello.
• Per il Western blot, rilevare una banda a circa 57 kDa. Utilizzare il tampone RIPA con detergenti adeguati per solubilizzare il CYP3A4 legato alla membrana.
• I lisati di tessuto epatico e intestinale servono come controlli positivi forti grazie all'alta espressione endogena.
• Per IHC-P e IF/ICC, eseguire il recupero dell'antigene e includere appropriati controlli isotipici per confermare la specificità della colorazione.
• Le applicazioni ELISA potrebbero richiedere la titolazione sia degli anticorpi di cattura che di rilevamento; ottimizzare le condizioni per il formato della piastra.

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