Anticorpo policlonale di coniglio Anti-CYP46A1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6A2

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della CYP46A1

• La CYP46A1 è una monoossigenasi del citocromo P450 che funziona come colesterolo 24-idrossilasi, svolgendo un ruolo fondamentale nell'omeostasi del colesterolo cerebrale catalizzando l'idrossilazione in posizione C-24 della catena laterale del colesterolo, promuovendo quindi l'eliminazione del colesterolo dai neuroni. Riferimenti correlati: PMID:10377398 PMID:14640697 PMID:18621681
• Oltre al colesterolo, idrossila vari derivati del colesterolo e ormoni steroidei sia sull'anello che sulla catena laterale, convertendoli in ossisteroli attivi che partecipano alla segnalazione lipidica e alla biosintesi. Riferimenti correlati: PMID:12077124 PMID:14640697 PMID:28190002
• Agisce come epossidasi convertendo il desmosterolo in (24S),25-epossicolesterolo, un ligando per i recettori nucleari NR1H2 e NR1H3, che ha dimostrato di promuovere la neurogenesi nel cervello in via di sviluppo. Riferimenti correlati: PMID:25017465
• Può anche catalizzare il metabolismo ossidativo di xenobiotici come il clotrimazolo. Riferimenti correlati: PMID:20667828
• Promuovendo l'eliminazione del colesterolo, la CYP46A1 può attivare indirettamente la via del mevalonato e coordinare la sintesi di nuovo colesterolo e isoprenoidi non steroidei coinvolti nell'attività sinaptica e nell'apprendimento (per similarità).
• Si localizza nella membrana del reticolo endoplasmatico, nella membrana dei microsomi, nelle regioni pre e postsinaptiche e nelle proiezioni dendritiche.
• L'espressione è specifica per il cervello, con livelli di mRNA più elevati nelle zone della materia grigia; l'espressione aumenta linearmente con l'età ed è assente nel tessuto fetale.
• Parole chiave: Emina, ferro, legame metallico, monoossigenasi, ossidoreduttasi, metabolismo degli steroli, metabolismo del colesterolo, sinapsi, transmembrana, splicing alternativo.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 24–280, comprendendo un'ampia porzione N-terminale della proteina; sebbene questa regione sia probabilmente in grado di generare anticorpi contro la CYP46A1 a lunghezza intera, si consiglia di convalidare la reattività nel sistema di campionamento specifico, specialmente quando si rilevano potenziali isoforme o frammenti.
• Per il Western blotting è prevista una banda vicino a 57 kDa; si consiglia l'utilizzo di un gel SDS-PAGE al 10% e condizioni di trasferimento appropriate per questo intervallo di peso molecolare.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, poiché la CYP46A1 è una proteina integrale di membrana del RE, si consiglia una permeabilizzazione mite con detergenti come lo 0,1% Triton X‑100; la co-colorazione con un marcatore del RE può confermare la localizzazione.
• Per le applicazioni ELISA, titrare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevamento e ottimizzare utilizzando un controllo positivo noto (ad esempio proteina CYP46A1 ricombinante o lisato di tessuto); la reattività incrociata con gli ortologhi di topo e ratto supporta l'utilizzo in modelli di roditori.

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