Anticorpo policlonale Anti-Citoesina-1 (CYTH1) per WB, IF/ICC, ELISA - Q15438

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Citoesina-1

• La Citoesina-1 (CYTH1) è un membro della famiglia delle citoesine dei fattori di scambio di nucleotidi guaninici (GEF) che attivano le piccole GTPasi del fattore di ADP-ribosilazione (ARF), fungendo da regolatore cruciale del traffico vescicolare intracellulare.
• La proteina è caratterizzata da un dominio di omologia pleckstrina (PH) per il legame dei fosfoinositidi, un dominio Sec7 responsabile della sua attività GEF e un dominio a elica avvolta (coiled-coil) coinvolto nelle interazioni proteina-proteina.
• CYTH1 catalizza specificamente lo scambio di nucleotidi guaninici su ARF1, ARF5 e ARF6 promuovendo la sostituzione del GDP con GTP, controllando così il loro stato di attivazione.
• Attraverso la regolazione di ARF6, svolge un ruolo fondamentale negli eventi di traffico di membrana essenziali per il rimodellamento delle giunzioni e l'istituzione della polarità delle cellule epiteliali.
• Espressa ubiquitariamente nei tessuti, riflettendo il suo ruolo fondamentale nei processi di trasporto cellulare.
• A livello subcellulare, CYTH1 si localizza alla membrana cellulare, al citosol e alle giunzioni cellula-cellula incluse le giunzioni strette (tight junctions) e le giunzioni aderenti (adherens junctions), coerentemente con le sue funzioni nella dinamica di membrana e nell'adesione cellulare.
• Le modifiche post-traduzionali includono l'acetilazione e la coniugazione dell'ubiquitina, e la struttura tridimensionale della proteina è stata risolta.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno è costituito dai 70 amminoacidi N-terminali della CYTH1 umana, una regione che può essere conservata tra le specie (supportando la cross-reattività dell'anticorpo con topo e ratto) e potenzialmente conservata nelle isoforme di splicing alternativo.
• Per il Western blot, la banda prevista migra a circa 46 kDa; la diluizione ottimale dell'anticorpo e le condizioni di bloccaggio devono essere determinate empiricamente utilizzando lisati di controllo positivo (es. cellule HeLa, HEK293 o U-2 OS).
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, si raccomandano fissativi come il paraformaldeide al 4% e la permeabilizzazione con Triton X-100 allo 0,1–0,3%; tuttavia, il metodo scelto deve preservare le strutture di membrana e le giunzioni dove CYTH1 si localizza.
• Per le applicazioni ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento dopo un'adeguata ottimizzazione, inclusa la prova di diverse condizioni di rivestimento e bloccaggio.

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