Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Cheratina 1 (KRT1) per WB, IF-P, ELISA - P04264

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Cheratina 1 (KRT1)

• La cheratina 1 citoscheletrica di tipo II (KRT1), denominata anche citocheratina-1 (CK-1) o citocheratina da 67 kDa, è una proteina a filamento intermedio di tipo II codificata dal gene KRT1 nell'uomo.
• Come componente strutturale dei filamenti intermedi, KRT1 forma eteropolimeri con le cheratine di tipo I, fornendo resistenza meccanica e stabilità ai cheratinociti suprabasali in differenziazione degli epiteli stratificati. Riferimenti bibliografici: PMID:1381288
• Attraverso le interazioni con l'integrina beta-1 (ITB1) e il recettore della chinasi C proteica attivata 1 (RACK1), KRT1 può regolare l'attività di chinasi come PKC e SRC. Riferimenti bibliografici: PMID:17956333
• In complesso con C1QBP, KRT1 funge da recettore ad alta affinità per il chinogeno-1 (HMWK), collegando i filamenti intermedi alla segnalazione cellulare. Riferimenti bibliografici: PMID:21544310
• Subcellulosamente, KRT1 si localizza sia nel citoplasma sia sulla membrana cellulare, in linea con le sue funzioni strutturali e di recettore.
• KRT1 è espresso prevalentemente nell'epidermide in fase di differenziazione terminale; la fonte proteica per la caratterizzazione è spesso il prepuzio neonatale.
• Questa cheratina subisce diverse modifiche post-traduzionali, tra cui fosforilazione, metilazione e citrullinazione, ed è associata a patologie cutanee come l'ittiosi e la cheratoderma palmoplantare in caso di mutazione.

Indicazioni sperimentali e consigli tecnici

• L'immunogeno è un peptide sintetico che copre la regione amminoacidica 545–644 nella porzione C-terminale della KRT1 umana. Questa regione è probabilmente esposta sulla superficie dei filamenti assemblati, quindi l'anticorpo è adatto per rilevare sia la KRT1 denaturata sia quella nativa in condizioni appropriate.
• Per il Western blotting (WB), il peso molecolare previsto di KRT1 è di circa 66 kDa. Aggiungere agenti riducenti appropriati e passaggi di denaturazione; convalidare la rilevazione nei lisati cellulari o tissutali specifici, poiché l'estrazione delle cheratine può richiedere buffer ad alto contenuto di sale o urea.
• Nell'immunofluorescenza di sezioni inclusionate in paraffina (IF-P), il recupero dell'antigene è essenziale. Un passaggio di permeabilizzazione può migliorare l'accessibilità al bersaglio intracellulare. Confermare la reattività con campioni di pelle umana, di topo o di ratto.
• Per l'ELISA, accoppiare questo anticorpo monoclonale con un anticorpo di rilevamento della cheratina di tipo I appropriato se si sviluppa un test immunologico sandwich. Titolare sia il reagente di cattura sia quello di rilevamento nel proprio sistema di analisi.
• Poiché la reattività crociata è stata rilevata per uomo, topo e ratto, si consiglia di verificare la conservazione dell'epitopo tramite allineamento della sequenza della regione immunogena e di utilizzare controlli specifici per specie.

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