Anticorpo policlonale coniglio anti-Citocheratina 12 (KRT12) per WB ed ELISA - Q99456

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Citocheratina 12 (KRT12)

• Codifica una proteina dei filamenti intermedi di cheratina di tipo I, la cheratina 12 (K12), che si accoppia con la cheratina di tipo II KRT3 per formare filamenti eteropolimerici nell'epitelio corneale.
• Fondamentale per fornire resistenza meccanica e integrità strutturale allo strato epiteliale corneale, proteggendo così la superficie dell'occhio.
• L'espressione è limitata all'epitelio corneale, come confermato a livello proteico, rendendolo un marcatore affidabile per le cellule epiteliali corneali.
• Le mutazioni in KRT12 sono associate alla distrofia corneale di Meesmann (MECD1), un disturbo autosomico dominante caratterizzato da microcisti dell'epitelio corneale.
• Appartiene alla famiglia delle cheratine dei geni dei filamenti intermedi, critica per la citoarchitettura e la resilienza dei tessuti epiteliali.
• La proteina subisce modificazioni post-traduzionali ed è stata identificata tramite sequenziamento proteico diretto e proteomica basata sulla spettrometria di massa.
• Il peso molecolare previsto da UniProt è di circa 53,5 kDa (53511 Da), coerente con il peso osservato del prodotto di 54 kDa.
• Come proteina dei filamenti intermedi, KRT12 si localizza prevalentemente nel citoplasma delle cellule epiteliali corneali.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde alla regione C-terminale (aa 295-494) della KRT12 umana, comprendendo parte dei domini a bastone e della coda. Questa regione può conferire specificità rispetto ad altre cheratine; la specificità deve essere confermata utilizzando proteine ricombinanti o controlli appropriati.
• Per il Western blot, è prevista una banda a circa 54 kDa. Utilizzare lisati di controllo positivo da cellule epiteliali corneali umane o estratti tissutali. La reattività crociata con topo e ratto suggerisce una potenziale utilità negli studi corneali sui roditori, ma si raccomanda la validazione in queste specie.
• Nell'ELISA, l'anticorpo può essere impiegato per il rilevamento diretto o indiretto. Ottimizzare le condizioni di rivestimento e la diluizione dell'anticorpo sperimentalmente. Quando si sviluppa un ELISA a sandwich, l'abbinamento con un anticorpo di cattura specifico per KRT12 può migliorare le prestazioni.
• Essendo un anticorpo policlonale, è possibile una variabilità da lotto a lotto. Le prestazioni costanti devono essere verificate utilizzando protocolli standardizzati e controlli interni.
• Le applicazioni oltre a WB ed ELISA (es. immunofluorescenza, immunochimica) non sono elencate nelle specifiche e richiederebbero un'approfondita validazione da parte dell'utente finale.

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