Anticorpo policlonale Anti-Citocheratina 14 (KRT14) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02533

Specifiche e Parametri Fondamentali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Citocheratina 14

• La cheratina 14 citoscheletrica di tipo I (KRT14), indicata anche come Citocheratina-14 (CK-14) e Cheratina-14 (K14), è un membro della famiglia delle cheratine di tipo I delle proteine dei filamenti intermedi.
• KRT14 forma eteropolimeri obbligati con la cheratina di tipo II KRT5, contribuendo alla rete dei filamenti intermedi di cheratina che conferisce resistenza meccanica e integrità strutturale allo strato basale dell'epidermide e ad altri epiteli stratificati. Riferimenti correlati: PMID:11724817 PMID:1694855 PMID:1720261
• Il dominio della coda non elicoidale di KRT14 promuove l'auto-organizzazione dei filamenti KRT5-KRT14 in fasci grandi e aumenta la resilienza meccanica dei filamenti intermedi di cheratina in vitro. Riferimenti correlati: PMID:11724817
• Subcellolarmente, KRT14 si localizza sia nel citoplasma sia nel nucleo, in linea con il suo ruolo nel mantenimento dell'architettura citoscheletrica e con le potenziali funzioni nucleari.
• L'espressione tissutale è marcata nei cheratinociti basali degli epiteli stratificati: rilevata nell'epitelio corneale, nello strato epidermico basale e nella guaina esterna della radice dei follicoli piliferi in anagen, ma assente dagli strati soprabasali terminalmente differenziati come lo strato corneo.
• Le variazioni genetiche di KRT14 sono associate a molteplici disturbi ereditari della fragilità cutanea, tra cui l'epidermolisi bollosa semplice, la displasia ectodermica e la cheratoderma palmoplantare.
• La proteina subisce modifiche post-traduzionali tra cui fosforilazione e ubiquitinazione, e contiene domini a spirale avvolta e legami disolfuro essenziali per l'assemblaggio e la stabilità del filamento.

Indicazioni Sperimentali e Consigli Tecnici

• L'immunogeno corrisponde agli amminoacidi 371-470 all'interno del dominio della coda non elicoidale C-terminale; l'anticorpo può riconoscere preferenzialmente epitopi in questa regione critica per l'aggregazione dei filamenti e la resilienza meccanica.
• Per Western blot, è prevista una banda vicino a 52 kDa nei lisati di cheratinociti; convalidare l'identificazione della banda usando controlli positivi (es. lisato di cellule HaCaT) e considerare che le modifiche post-traduzionali possono causare lievi spostamenti di migrazione.
• In immunoistochimica (paraffina) e immunofluorescenza, è prevista una forte colorazione citoplasmatica e nucleare nelle cellule epiteliali basali; pelle, cornea o sezioni di mucosa orale sono tessuti di controllo positivo adatti.
• La reattività crociata riportata con uomo, topo e ratto suggerisce epitopi conservati; tuttavia, per l'uso in altre specie o applicazioni che richiedono elevata specificità, si raccomanda l'allineamento della sequenza della regione immunogena.
• Come anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti può variare; convalidare ogni nuovo lotto nel proprio sistema di analisi, specialmente per applicazioni quantitative come l'ELISA.
• Per l'ELISA, il peptide sintetico immunogeno può essere usato come antigene di rivestimento per la titolazione dell'anticorpo o come controllo positivo per valutare l'attività legata alla piastra.

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