Anticorpo monoclonale di coniglio anti-Citokeratina 14 (KRT14) per WB, IHC-P, ELISA - P02533

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Citokeratina 14

• KRT14 è una proteina filamentosa intermedia di tipo I, essenziale per la struttura scheletrica dei cheratinociti basali. Forma eteropolimeri obbligati con KRT5, creando una rete citoscheletrica resiliente che fornisce resistenza meccanica all'epidermide e ad altri epiteli stratificati. Riferimenti correlati: PMID:11724817, PMID:1694855, PMID:1720261

• Il dominio della coda non elicoidale di KRT14 promuove l'autoassemblaggio dei filamenti KRT5-KRT14 in fasci grandi, aumentando la resilienza dei filamenti in vitro. Riferimenti correlati: PMID:11724817

• KRT14 è localizzato principalmente nel citoplasma, ma può raggiungere anche il nucleo. È espresso in grandi quantità nello strato basale degli epiteli stratificati, tra cui epidermide, epitelio corneale e guaina esterna dei follicoli piliferi, con una espressione ridotta negli strati soprabasali.

• Modifiche post-traduzionali come fosforilazione, formazione di ponti disolfuro e ubiquitinazione possono regolare la dinamica e la stabilità dei filamenti KRT14.

• Le varianti patogeniche di KRT14 sono associate a sindromi di fragilità cutanea come l'epidermolisi bollosa semplice (EBS) e la displasia ectodermica, a conferma del suo ruolo fondamentale nell'integrità epiteliale.

• L'espressione di KRT14 è altamente tessuto-specifica: è presente nei cheratinociti basali e intorno ai peli a clava durante il telogeno, ma è assente nello strato corneo e nella guaina interna.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre il dominio a bastone centrale di KRT14 umano (aa 264-457); grazie all'elevata omologia, l'anticorpo è previsto che reagisca in modo crociato con KRT14 di topo e ratto, come indicato dal fornitore. Si raccomanda sempre una validazione nella specie/tessuto di interesse.

• Per Western blot è prevista una banda a ~52kDa; ottimizzare il carico e la diluizione dell'anticorpo per una rilevazione chiara in lisati da tessuti ricchi di cheratinociti (ad es. pelle, mucosa orale).

• Per IHC-P utilizzare sezioni fissate in formalina e incluse in paraffina; può essere necessario il recupero dell'antigene. La colorazione KRT14 contrassegna le cellule basali; aspettarsi un segnale positivo nello strato basale dell'epidermide e di altri epiteli stratificati.

• Nelle applicazioni ELISA utilizzare la proteina KRT14 ricombinante purificata come standard e validare con campioni positivi/negativi noti.

• Poiché KRT14 forma complessi con KRT5, prendere in considerazione esperimenti di co-immunoprecipitazione per studiare l'assemblaggio dei filamenti di cheratina.

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