Anticorpo policlonale di coniglio anti-Citocheratina 20 (KRT20) per WB, IF/ICC, ELISA - P35900

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: funzione e localizzazione della Citocheratina 20 (KRT20)

• La cheratina citoscheletrica di tipo I 20 (KRT20), nota anche come Citocheratina-20 (CK-20), Cheratina-20 (K20) o Proteina IT, è una proteina dei filamenti intermedi di cheratina di tipo I.
• Svolge un ruolo significativo nel mantenimento dell'organizzazione dei filamenti di cheratina negli epiteli intestinali. Quando fosforilata, KRT20 è coinvolta nella secrezione di mucina nell'intestino tenue (per similitudine).
• La localizzazione subcellulare è citoplasmatica, coerentemente con il suo ruolo di componente del citoscheletro.
• È espressa prevalentemente nell'epitelio intestinale, con localizzazione specifica nelle cellule luminali della mucosa del colon. È inoltre espressa nelle cellule di Merkel della mucosa orale cheratinizzata, comprese le creste reticolari gengivali, lo strato basale palatale e le papille gustative linguali.
• È classificata nelle parole chiave UniProt: Apoptosi, Coiled coil, Citoplasma, Sequenziamento diretto delle proteine, Filamento intermedio, Cheratina, Fosfoproteina, Identificazione proteomica, Proteoma di riferimento.
• La proteina ha un peso molecolare di circa 48.487 Da (UniProt), ma migra a ~48 kDa nella SDS-PAGE.

Indicazioni sperimentali e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a una porzione centrale della KRT20 umana (aa 245-424), conservata nel topo; la reattività crociata con il topo è stata convalidata. Prima dell'uso, prendere in considerazione l'allineamento delle sequenze per altre specie.
• Per il Western blot, è prevista una banda a ~48 kDa. Ottimizzare il blocco e la diluizione dell'anticorpo utilizzando un lisato cellulare rilevante (ad esempio, cellule intestinali Caco-2 o HT-29).
• Nell'immunofluorescenza/immunocitochimica, testare le condizioni di fissazione e permeabilizzazione; convalidare la colorazione nucleare rispetto a quella citoplasmatica nelle linee cellulari intestinali.
• Per l'ELISA, utilizzare KRT20 ricombinante o un peptide specifico come antigene di rivestimento; eseguire una titolazione per determinare la concentrazione di lavoro ottimale.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti deve essere verificata nell'applicazione prevista.

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