Anticorpo policlonale di coniglio Anti-Cytokeratina 7 (KRT7) per WB, IF-P, ELISA - P08729

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della Cheratina 7 (Citocheratina 7/KRT7)

• La cheratina 7 (KRT7), nota anche come citocheratina-7 (CK-7), sarcolettina o cheratina di tipo II Kb7, è un membro della famiglia delle cheratine di tipo II, che forma reti citoscheletriche a filamenti intermedi essenziali per l'integrità strutturale delle cellule epiteliali.
• KRT7 si accoppia con le cheratine di tipo I (es. KRT19) per assemblare eterodimeri che polimerizzano in filamenti intermedi da 10 nm, mantenendo l'architettura citoplasmatica e la resistenza meccanica negli epiteli semplici e ghiandolari.
• In modo non convenzionale, KRT7 blocca l'interfase dipendente dall'interferone e stimola la sintesi del DNA, suggerendo un ruolo regolatorio nella progressione del ciclo cellulare al di là delle funzioni citoscheletriche.
• KRT7 è coinvolto nella regolazione traslazionale dell'mRNA E7 del papillomavirus umano di tipo 16 (HPV16), il che lo implica nelle interazioni ospite-virus e nelle vie oncogeniche.
• La proteina è localizzata prevalentemente nel citoplasma (UniProt: P08729), in linea con le sue attività strutturali e non canoniche citoplasmatiche.
• Le principali modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione, metilazione e ubiquitinazione, che possono modulare la sua stabilità, l'assemblaggio dei filamenti e le interazioni proteiche; è anche una glicoproteina e contiene legami isopeptidici.
• L'espressione tissutale è ristretta: KRT7 si osserva in cellule epidermiche, bronchiali e mesoteliali in coltura, e nelle cellule ghiandolari della giunzione gastroesofagea, ma è assente nel colon, nell'ectocervice, nel fegato e nell'esofago, il che lo rende un marcatore di lignaggio utile.
• Parole chiave aggiuntive: filamento intermedio, coil avvolto, interazione ospite-virus, identificazione proteomica, proteoma di riferimento, coniugazione Ubl.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 230–469 di KRT7 umano (NP_005547.3), bersagliando una regione interna della proteina; questo progetto può facilitare la rilevazione di KRT7 full-length in condizioni di western blot denaturante.
• Per il western blot (WB) è prevista una banda intorno ai 51 kDa; includere controlli positivi appropriati (es. lisati da linee cellulari epiteliali note per esprimere KRT7) e controlli negativi (es. tessuti del colon o del fegato, privi di KRT7).
• Nell'immunofluorescenza (IF-P), ottimizzare i protocolli di fissazione e permeabilizzazione per preservare la struttura dei filamenti intermedi citoplasmatici; la co-colorazione con un colorante nucleare (es. DAPI) può confermare la localizzazione subcellulare.
• L'anticorpo ha dimostrato reattività incrociata con ortologhi KRT7 di topo e ratto; tuttavia, è necessario verificare l'omologia di sequenza e si raccomanda la validazione nella specie di interesse.
• Per l'ELISA, accoppiare con un anticorpo di rilevazione adatto o utilizzarlo come reagente di cattura; sono consigliati esperimenti di titolazione per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali.

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