Anticorpo policlonale coniglio anti-Cytokeratina 8 (KRT8) per WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P05787

Specifiche e parametri principali del prodotto

Background biologico: Funzione e localizzazione della Citokeratina 8 (KRT8)

• Costituisce la componente strutturale dei filamenti intermedi di cheratina nelle cellule epiteliali semplici, e si associa a KRT18 per formare una rete che garantisce stabilità meccanica e resilienza (PubMed:26823019). Riferimenti correlati: PMID:26823019
• Aiuta a mantenere l'integrità epiteliale e protegge le cellule da stress non meccanici, inclusa l'apoptosi (per similarità).
• È necessario per la formazione e il rinforzo delle fibre di actina mediate da ARHGEF40 in risposta a forze di tensione (PubMed:26823019). Riferimenti correlati: PMID:26823019
• Nel muscolo striato, interagisce con KRT19 per collegare l'apparato contrattile alla distrofina nei costameri (PubMed:16000376). Riferimenti correlati: PMID:16000376
• Si localizza nel citoplasma, nel nucleoplasma, nella matrice nucleare e nel citoscheletro.
• È rilevabile nelle fibre muscolari che si accumulano nei costameri del mioplasma, ed è espresso nella mucosa gengivale e nel palato duro.
• Le modifiche post-traduzionali includono acetilazione, fosforilazione, glicosilazione, metilazione e ubiquitinazione; è classificato tra le cheratine, i filamenti intermedi e le varianti associate a malattie.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per Western blot (WB), l'immunogeno copre la proteina KRT8 full-length; il peso molecolare previsto è di ~53,7 kDa, ma le modifiche post-traduzionali possono determinare la comparsa di bande a 54-56 kDa. Ottimizzare empiricamente i controlli di caricamento e le diluizioni dell'anticorpo.
• Nell'immunistochimica (IHC-P), si consigliano metodi di recupero dell'antigene indotto da calore e protocolli appropriati di fissazione dei tessuti per smascherare gli epitopi; convalidare utilizzando controlli tissutali positivi e negativi noti.
• Per l'immunofluorescenza (IF/ICC), possono essere necessari passaggi di permeabilizzazione per rilevare il bersaglio intracellulare; testare diverse condizioni di blocco per minimizzare il segnale di fondo.
• L'anticorpo mostra reattività crociata con KRT8 di topo, ma l'allineamento della sequenza vicino alla regione dell'immunogeno può aiutare a prevedere la reattività in altre specie; si consiglia un'analisi di omologia di sequenza.
• Essendo un anticorpo policlonale, la coerenza tra lotti può variare; titrare sempre l'anticorpo per ogni nuova applicazione o sistema sperimentale.

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