Anticorpo Policlonale di Coniglio Anti-Cheratina 9 (KRT9) per WB, IF-P, ELISA - P35527

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della Cheratina 9 (KRT9)

• La Cheratina 9 (KRT9), nota anche come Cheratina-9 (K9) o CK-9, è una cheratina citoscheletrica di tipo I codificata dal gene KRT9 nell'uomo.
• Funge da componente strutturale dei filamenti intermedi specificamente nei cheratinociti soprabasali dell'epidermide palmoplantare, assemblandosi con cheratine di tipo II per formare robuste reti cheratiniche.
• Queste reti di filamenti intermedi cheratinici sono essenziali per mantenere l'integrità meccanica e la resilienza della pelle di palmi e piante, resistendo a pressione e attrito significativi.
• L'espressione di KRT9 è strettamente limitata all'epidermide terminalmente differenziata di palmi e piante, sottolineando il suo ruolo specializzato in queste aree corporee ad alto stress.
• Le mutazioni in KRT9 sono associate alla cheratodermia palmoplantare epidermolitica (EPPK), un disturbo cutaneo autosomico dominante caratterizzato da ispessimento diffuso della pelle di palmi e piante.
• La struttura proteica presenta un dominio centrale a bastoncino coiled-coil tipico delle proteine dei filamenti intermedi, che facilita la dimerizzazione e l'assemblaggio dei filamenti.
• La regolazione post-traduzionale può includere eventi di fosforilazione, come indicato da studi proteomici.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno copre gli amminoacidi 150–450 della KRT9 umana, una regione interna. Questo design può consentire il rilevamento della proteina KRT9 totale in vari tipi di campione.
• Per il Western blot (WB), utilizzare condizioni denaturanti e riducenti e considerare di includere un controllo di caricamento come GAPDH o β-actina. Il peso molecolare previsto è di circa 62 kDa; convalidare l'identità della banda utilizzando controlli positivi (ad es., lisato di pelle del palmo) e negativi appropriati.
• Per l'immunofluorescenza (IF-P), i metodi di fissazione e permeabilizzazione dovrebbero essere ottimizzati. Poiché KRT9 è un filamento intermedio citoplasmatico, la permeabilizzazione è essenziale. Includere una colorazione di contrasto nucleare come DAPI per visualizzare la localizzazione cellulare.
• Per le applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo utilizzando KRT9 ricombinante o lisati cellulari per determinare le diluizioni operative ottimali. L'abbinamento con un anticorpo di rilevamento corrispondente può migliorare la sensibilità.
• È riportata reattività crociata per umano, topo e ratto; tuttavia, verificare la specificità nella specie e nel contesto tissutale rilevanti, poiché l'espressione è limitata all'epidermide di palmi e piante.

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