Anticorpo policlonale anti-D2HGDH per WB e ELISA - Q8N465

Specifiche principali del prodotto e parametri

Contesto biologico: Funzione e localizzazione della D2HGDH

• D2HGDH (D-2-idrossiglutarato deidrogenasi) è un enzima mitocondriale che catalizza l'ossidazione del D-2-idrossiglutarato ad α-chetoglutarato, un passaggio critico nel metabolismo degli acidi D-2-idrossiacidi. Riferimenti correlati: PMID:15070399 PMID:15609246 PMID:16037974
• L'enzima accetta anche D-malato e D-lattato come substrati, esibendo un'alta attività verso il D-malato ma un'attività molto debole verso il D-lattato. Riferimenti correlati: PMID:33431826
• D2HGDH è una flavoproteina che richiede FAD e ione zinco come cofattori per la sua attività catalitica.
• È localizzata nella matrice mitocondriale, con un peptide di transito N-terminale che ne dirige l'importazione nell'organello.
• Lo splicing alternativo genera varianti di trascrizione multiple e la proteina è prontamente identificata nei set di dati di riferimento di proteomica.
• Le mutazioni nel gene D2HGDH sono associate all'acidosi D-2-idrossiglutarica, un grave disturbo neurometabolico, evidenziando la sua rilevanza clinica.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• L'immunogeno corrisponde a un frammento C-terminale (aminoacidi 322–521), quindi questo anticorpo policlonale è probabilmente in grado di rilevare sia la D2HGDH nativa che quella denaturata.
• Per il Western blot, caricare 20–30 µg di lisato ridotto-denaturato da campioni umani, di topo o di ratto e cercare una banda a circa 56 kDa. Ottimizzare empiricamente la diluizione dell'anticorpo primario.
• Nell'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento. Eseguire titrazioni a scacchiera con il proprio antigene per determinare le concentrazioni di lavoro ottimali.
• Poiché la variabilità da lotto a lotto può verificarsi con gli anticorpi policlonali, includere appropriati controlli positivi e negativi in ogni esperimento.

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