Anticorpo policlonale Anti-DAG1 per WB, IF/ICC, ELISA - Q14118

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DAG1

• Il distroglicano 1 (DAG1) è un componente centrale del complesso distrofina-glicoproteina, che collega la matrice extracellulare al citoscheletro intracellulare. È espresso come precursore che subisce una scissione autocatalitica in alfa-distroglicano periferico e beta-distroglicano transmembrana.
• Il complesso del distroglicano partecipa alla deposizione della laminina e all'assemblaggio della matrice extracellulare, al raggruppamento dei recettori dell'acetilcolina nella giunzione neuromuscolare, alla stabilità del sarcolemma, alla sopravvivenza cellulare, alla mielinizzazione dei nervi periferici, alla migrazione cellulare, alla polarizzazione epiteliale e alla morfogenesi del branching epiteliale.
• L'alfa-distroglicano lega le proteine della matrice extracellulare contenenti il dominio G della laminina (es. laminina-1/-2, agrina, perlecana) e media la segnalazione tramite le vie PI3K/AKT e Src-chinasi, regolando di conseguenza i segnali apoptotici e l'organizzazione sinaptica.
• Il beta-distroglicano si ancoraggio alla distrofina (DMD) o all'utrofina (UTRN) e collega l'assina al citoscheletro di actina, facilitando la segnalazione mediata dall'adesione cellulare e la polarità cellulare.
• Nella cartilagine, DAG1 lega l'agrina e up-regola il fattore di trascrizione condrogenico SOX9, regolando positivamente la formazione della cartilagine.
  Riferimenti correlati: PMID:26290588
• La proteina si localizza in più compartimenti: il sarcolemma e la membrana postsinaptica, i siti sinaptici, la membrana basale, lo spazio extracellulare, il citoplasma/citoscheletro e il nucleoplasma.
• DAG1 agisce come recettore cellulare ospite per gli arenavirus del nuovo mondo di classe C (Lassa, virus della coriomeningite linfocitaria) e per l'ingresso di Mycobacterium leprae nelle cellule di Schwann.
  Riferimenti correlati: PMID:16254364, PMID:17360738, PMID:19324387, PMID:9851927
• Espresso in una varietà di tessuti fetali e adulti, con una localizzazione prominente nella membrana basale dell'epidermide e espressione nei cheratinociti e nei fibroblasti.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno (aa 654–749) risiede nella porzione C-terminale del beta-distroglicano; ci si aspetta che l'anticorpo riconosca sia il precursore full-length di ~97 kDa che la subunità beta clivata (~43 kDa) nei Western blot denaturanti/riducenti.
• Per il Western blotting, convalidare il pattern di bande osservato in tessuti/linee cellulari noti positivi (es. muscolo scheletrico, cervello) e considerare l'utilizzo di lisati freschi con inibitori di proteasi per prevenire la degradazione.
• Nell'immunofluorescenza/ICC, la permeabilizzazione è necessaria per accedere all'epitopo intracellulare. La co-colorazione con marcatori del sarcolemma o della membrana basale può confermare la localizzazione.
• Per le applicazioni ELISA, titolare l'anticorpo come reagente di cattura o di rilevazione utilizzando frammenti di DAG1 ricombinante o lisati cellulari in condizioni standard; le prestazioni devono essere ottimizzate nel sistema di analisi dell'utente finale.
• La reattività incrociata tra specie è stata riportata per uomo, topo e ratto; se si lavora con altre specie, testare sperimentalmente e confermare preliminarmente l'omologia di sequenza.

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