Anticorpo Monoclonale Anti-DAP Kinase 1 (DAPK1) per WB e ELISA - P53355

Specifiche e Parametri Principali del Prodotto

Contesto Biologico: Funzione e Localizzazione della DAP Kinase 1 (DAPK1)

• Codifica una chinasi serina/treonina dipendente da calcio/calmodulina che integra segnali per apoptosi, autofagia e sopravvivenza cellulare a seconda del contesto cellulare.
• Media sia la morte apoptotica di tipo I dipendente da caspasi sia la morte autofagica di tipo II indipendente da caspasi, caratterizzata dall'accumulo di vescicole autofagiche.
• Regola substrati diversi tra cui PIN1, TPM1, STX1A, PRKD1, BECN1, TSC2, RPS6, MYL9, DAPK3 e GRINB, influenzando così la dinamica del citoscheletro, l'esocitosi, la segnalazione dello stress, l'induzione dell'autofagia, l'attività mTORC1 e l'eccitotossicità mediata dal recettore NMDA.
• L'isoforma 2 manca di attività apoptotica ma mantiene la capacità di indurre il blebbing della membrana; è espressa nel tessuto intestinale normale e nei carcinomi del colon-retto.
• Si localizza nel citoplasma e si associa al citoscheletro.
• Contiene domini distintivi: dominio chinasi N-terminale, regione di legame della calmodulina, ripetizioni ankirina e un dominio di morte C-terminale; possiede anche motivi di legame ATP e GTP.
• Elencato sotto parole chiave tra cui splicing alternativo, apoptosi, autofagia, fosfoproteina e coniugazione Ubl, riflettendo la sua complessa regolazione e versatilità funzionale.

Guida Sperimentale e Consigli Tecnici

• L'immunogeno si trova all'interno dei residui 250–350, una regione tra il dominio chinasi e il motivo di legame della calmodulina; considerare la verifica dell'accessibilità dell'epitopo in condizioni native rispetto a quelle denaturanti.
• Per il Western blot, una banda principale a ~160 kDa rappresenta la DAPK1 a lunghezza intera; bande aggiuntive possono derivare da isoforme di splicing o prodotti di degradazione—si consiglia la convalida con controlli appropriati (es. lisati di knockdown o knockout).
• Confermare la cross-reattività nei campioni di topo, poiché si riporta che l'anticorpo riconosce sia la DAPK1 umana che quella murina.
• Per ELISA, possono essere applicati protocolli indiretti standard o a sandwich; ottimizzare la concentrazione di rivestimento e le condizioni di rilevazione per il formato specifico del saggio.
• Tenere in considerazione che l'isoforma 2 potrebbe non contenere la sequenza peptidica; verificare i profili di espressione nel set di campioni (es. tessuto intestinale normale vs canceroso) per evitare interpretazioni errate.

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