Anticorpo policlonale Anti-DAP Kinase 1 (DAPK1) per WB, IHC-P, ELISA - P53355

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione del DAP Kinase 1 (DAPK1)

• Il DAPK1 è una chinasi serina/treonina dipendente da calcio/calmodulina che integra molteplici vie di segnalazione cellulare, governando la sopravvivenza cellulare, l'apoptosi e l'autofagia.
• Regola sia la morte apoptotica di tipo I dipendente da caspasi sia la morte cellulare autofagica di tipo II indipendente da caspasi, a seconda del contesto cellulare.
• Il DAPK1 fosforila un'ampia gamma di substrati — tra cui PIN1, TPM1, STX1A, PRKD1, BECN1, TSC2, RPS6, MYL9 e DAPK3 — modulando la localizzazione nucleare, la dinamica del citoscheletro, il traffico vescicolare e la segnalazione metabolica.
• Nell'ictus, il DAPK1 agisce come amplificatore della segnalazione del recettore NMDA, fosforilando GRINB a Ser-1303 per guidare un dannoso afflusso di Ca2+ e la morte neuronale irreversibile.
• L'isoforma 2, generata da splicing alternativo, non può indurre l'apoptosi ma promuove il blebbing membranoso; è espressa nel tessuto intestinale normale e nei carcinomi del colon-retto.
• La localizzazione subcellulare è prevalentemente citoplasmatica e associata al citoscheletro, coerente con i suoi ruoli nel rimodellamento e nella segnalazione.
• La proteina presenta un'architettura multidominio che include un dominio chinasi, un dominio di legame della calmodulina, ripetizioni ankirina e un dominio di morte, a supporto della sua funzione nella regolazione della morte cellulare.

Guida sperimentale e suggerimenti tecnici

• Per la WB, è prevista una banda specifica a circa 160 kDa nei lisati di campioni umani, di topo o di ratto; confermare la specificità utilizzando appropriati controlli positivi e negativi.
• Nella IHC-P, ottimizzare il recupero dell'antigene e la diluizione dell'anticorpo; considerare i pattern di espressione noti (es. cervello, epitelio intestinale) per la validazione.
• Per l'ELISA, l'anticorpo può essere utilizzato come reagente di cattura o di rilevamento; si raccomanda la determinazione empirica della concentrazione di rivestimento e dei partner di accoppiamento.

Dato che l'immunogeno mappa la regione C-terminale (aa 1141-1430), verificare il rilevamento dell'isoforma 2 nei sistemi sperimentali pertinenti, se necessario.

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