Anticorpo policlonale Anti-DARS2 per WB, IHC-P, ELISA - Q6PI48

Specifiche e parametri principali del prodotto

Contesto biologico: Funzione e localizzazione di DARS2

• DARS2 codifica per l'aspartil-tRNA sintetasi mitocondriale (AspRS), un membro della famiglia delle aminoacil-tRNA sintetasi di classe II fondamentale per la sintesi proteica mitocondriale.
• Catalizza l'attaccamento in due fasi dell'aspartato al tRNA(Asp): prima attiva l'aspartato con ATP per formare Asp-AMP, poi trasferisce l'aspartato all'estremità accettore del tRNA.
• Si localizza principalmente nella matrice mitocondriale e può associarsi alla membrana mitocondriale, riflettendo il suo ruolo nella traduzione mitocondriale.
• Nomi alternativi sono LBSL, ASPRS, mtAspRS e MT-ASPRS; la proteina è la controparte mitocondriale della DARS citoplasmatica.
• Le mutazioni in DARS2 causano la leucoencefalopatia con coinvolgimento del tronco encefalico e del midollo spinale e aumento del lattato (LBSL), collegando il gene alla neurodegenerazione e alla malattia di Charcot-Marie-Tooth.
• Sono state identificate modifiche post-traduzionali come acetilazione, fosforilazione e ubiquitinazione, che potenzialmente regolano l'attività o la stabilità dell'enzima.
• La proteina è anche annotata per struttura 3D, legame all'ATP e legame isopeptidico, evidenziando il suo meccanismo catalitico conservato.

Guida sperimentale e consigli tecnici

• L'immunogeno copre la regione C-terminale (aa 406–645), che include parte del dominio catalitico; confermare la banda rilevata a ~74 kDa nel proprio tipo di campione e considerare la possibilità di splicing alternativo o processamento.
• Per Western blot, ottimizzare la diluizione dell'anticorpo (es. 1:500–1:2000) e utilizzare lisati arricchiti di mitocondri per aumentare il segnale, data la localizzazione mitocondriale.
• Nell'IHC-P, testare le condizioni di recupero dell'antigene (es. tampone citrato pH 6.0) e includere un controllo senza anticorpo primario per valutare la specificità.
• Per ELISA, abbinare a un anticorpo secondario coniugato con enzima appropriato e convalidare la linearità utilizzando proteina DARS2 ricombinante come standard.

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